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speedking木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助大神幫忙分析PCR失敗的原因��！ 已有2人參與
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附件里是我的pcr產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳圖，兩邊的是marker條帶，請(qǐng)各位幫忙分析一下原因��！ 100001512988816.jpg |
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甲方不怕乙方
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
speedking: 金幣+10, ★有幫助 2015-08-10 14:06:25
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speedking: 金幣+10, ★有幫助 2015-08-10 14:06:25
| 你marker都有問(wèn)題，首先肯定和電泳液和膠板有問(wèn)題，換新的電泳液或者重新制備新的膠板再試試，再者就是你跑的時(shí)間太短了吧，好像marker都沒(méi)有跑開呢，不過(guò)盡管如此，還是可以看到你好像沒(méi)有目的條帶，只是一些引物二聚體，所以你還需要重新確定退火溫度或者重新設(shè)計(jì)引物了。總之，這是一次非常失敗的電泳，原諒我說(shuō)的比較直白，呵呵。希望對(duì)你有幫助，祝好！ |
3樓2015-04-23 17:20:00
董博士
金蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
| 這個(gè)是沒(méi)有擴(kuò)增成功啊，下面那一條帶應(yīng)該是引物二聚體了，具體的原因有很多，比如模板是否正確，引物設(shè)計(jì)是否合理，退火溫度等，我之前發(fā)過(guò)一個(gè)關(guān)于質(zhì)粒重組的帖子，里面分析了很多相關(guān)過(guò)程的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法，您可以看一下，肯定會(huì)有幫助的。http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=8629917 |
2樓2015-04-23 16:03:32
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