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莫丶言木蟲 (小有名氣)
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[交流]
請問有用過建成試劑盒測植物組織酶活的沒有？ 已有6人參與
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最近想用南京建成的試劑盒測一下植物組織中的酶活，有些疑問不知道大家可否幫忙解答： 1.我在田間采樣，是不是需要把樣品放在冰盒中帶到實驗室，然后稱重，用液氮研磨，不知道這種方法可行否？ 2.緩沖液不知道是該用什么樣的緩沖液，以及比例。 3.另外因為采樣的地方?jīng)]有儀器設(shè)備，需要把處理好的樣品提取液保存，不知道該放到多少溫度下保存，能夠保存多長時間。 4.因為沒用過試劑盒，不知道測酶活時5種不同酶可否用同一份提取液，用過這家試劑盒 的可否指教一下使用注意事項。 問的比較多也挺初級，還望各位蟲友不厭解答，謝謝！ |
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starseacow
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你可以去讀一讀和酶活性有關(guān)的教科書，在低溫條件下，酶催化能力降低，但單純低溫不影響蛋白生理結(jié)構(gòu)，所以溫度回升以后酶活性恢復(fù)，而高溫則會破壞酶生理結(jié)構(gòu)。從我自己的經(jīng)驗，我試過液氮研磨和鮮樣冰浴研磨，前者我只試過抗氧化酶如CAT，影響不大，但結(jié)果精密度不如鮮樣研磨。 前面的蟲友不推薦液氮，我認(rèn)為也有一定道理，但理由是液氮研磨如果處理不妥，在過程中有反復(fù)凍融，反而會影響蛋白結(jié)構(gòu)導(dǎo)致測不出結(jié)果。如果你堅持用液氮，應(yīng)盡可能保證材料在研磨過程中浸泡在液態(tài)中。 |
8樓2015-05-07 14:11:22
莫丶言
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10樓2015-05-08 11:13:58
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