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[交流] 會(huì)反轉(zhuǎn)錄PCR的進(jìn)來(lái)看一下可以么已有3人參與

我想做反轉(zhuǎn)錄PCR，結(jié)果跑膠對(duì)比灰度值，我想問(wèn)問(wèn)引物怎么設(shè)計(jì)，一定要包含全部編碼基因嗎？

有的序列7000多，沒(méi)辦法包括全部編碼基因怎么辦。雖然設(shè)計(jì)個(gè)基因是不是也不能有參考性

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1樓 2015-05-08 12:11:26

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晞朔

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“結(jié)果跑膠對(duì)比灰度值”是什么意思？是想半定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)嗎？若是半定量，選取一段特異序列設(shè)計(jì)引物就可以，不可有非特異擴(kuò)增和二聚體。我一般設(shè)計(jì)片段長(zhǎng)度300-600bp

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2樓2015-05-09 07:53:12

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引用回帖:

2樓: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-09 07:53:12
“結(jié)果跑膠對(duì)比灰度值”是什么意思？是想半定量PCR檢測(cè)基因表達(dá)嗎？若是半定量，選取一段特異序列設(shè)計(jì)引物就可以，不可有非特異擴(kuò)增和二聚體。我一般設(shè)計(jì)片段長(zhǎng)度300-600bp

對(duì) 就是半定量

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3樓2015-05-11 12:44:41

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隨風(fēng)飄搖11

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不需要，好像200bp-400bp都?jí)蛄�，最好誇內(nèi)含子

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4樓2015-05-11 23:00:33

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一樓，四樓都是對(duì)的，跨內(nèi)含子確實(shí)好一些

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5樓2015-05-12 05:08:04

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