 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 843 | 回復(fù): 5 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
xynlwt新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
SSR預(yù)實(shí)驗(yàn)熒光帶不上 已有2人參與
|
|
| 如題，SSR的預(yù)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)做了很久，熒光基團(tuán)總是加不到目的片段上，而是加在二聚體或者其他雜帶上，20ul和10ul體系都能P出來，用的酶是天根的TAQ MIX，引物部分試過三種都失敗了，其他水和DNA的比例問題不大。1），F(xiàn)引物：M13F引物：修飾基團(tuán)：R引物=2：3：5：10。2），F(xiàn)引物：M13F引物：修飾基團(tuán)：R引物=0.5:0.5:9:10。這種熒光加在目的片段上一點(diǎn)點(diǎn)，峰極低，幾乎看不見。3），用了兩輪，第一輪，M13F引物：R=1:1。第一輪產(chǎn)物用作第二輪模板，第二輪引物比例為，修飾基團(tuán)：R引物=1:1。峰還是很低，要么就是依然加在比較短的雜帶上。最后想看看正常情況到底應(yīng)該什么樣，就合了一條直接把修飾基團(tuán)加在F引物上的引物，這次確實(shí)加到了目的片段上，但是這種方法太貴了，預(yù)實(shí)驗(yàn)的話會(huì)遠(yuǎn)超預(yù)算，只有預(yù)實(shí)驗(yàn)先做好了正式實(shí)驗(yàn)再用，所以請(qǐng)大神們幫我看看怎樣能把這個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)部分做出來，謝了！ |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有257人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 實(shí)驗(yàn)上如何區(qū)分熒光材料和磷光材料
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 求助～花粉管熒光實(shí)驗(yàn)～
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 求助熒光納米顆粒標(biāo)記免疫分析實(shí)驗(yàn) 謝謝
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 彗星實(shí)驗(yàn),熒光顯微鏡下找不到DNA是怎么回事
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 間接免疫熒光法檢測(cè)細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)步驟
已經(jīng)有1人回復(fù)
- ZBLAN：Er離子2H11/2及其一下能級(jí)的熒光壽命數(shù)據(jù)，是實(shí)驗(yàn)測(cè)出的熒光壽命！
已經(jīng)有28人回復(fù)
- 多重?zé)晒鈽?biāo)記實(shí)驗(yàn)中，如何選擇熒光染料
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 求助 SSR實(shí)驗(yàn)技術(shù)
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 有木有人做毛細(xì)管電泳熒光檢測(cè)SSR標(biāo)記的啊~~
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 請(qǐng)教下實(shí)驗(yàn)室怎么讓熒光粉較好的粘接在陶瓷片（玻璃板）上面
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光原位雜交實(shí)驗(yàn)技術(shù)
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（二）
已經(jīng)有12人回復(fù)
xynlwt
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 126.1
- 帖子: 23
- 在線: 21.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1957964
- 注冊(cè): 2012-08-27
- 專業(yè): 植物進(jìn)化生物學(xué)
5樓2015-05-12 14:13:14
xynlwt
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 126.1
- 帖子: 23
- 在線: 21.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1957964
- 注冊(cè): 2012-08-27
- 專業(yè): 植物進(jìn)化生物學(xué)
2樓2015-05-11 15:05:53
yingheqian
金蟲 (著名寫手)
- 應(yīng)助: 584 (博士)
- 金幣: 562.6
- 散金: 1899
- 紅花: 32
- 帖子: 2063
- 在線: 283.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 3744032
- 注冊(cè): 2015-03-17
- 性別: GG
- 專業(yè): 養(yǎng)蠶學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2015-05-12 08:03:47
xynlwt: 金幣+1, ★有幫助 2015-05-12 14:17:31
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
kx444555: 金幣+1, 鼓勵(lì)交流 2015-05-12 08:03:47
xynlwt: 金幣+1, ★有幫助 2015-05-12 14:17:31
| 這個(gè)效果肯定沒有直接標(biāo)記在引物上好，我們?cè)囘^引物合成的時(shí)候合成長(zhǎng)一點(diǎn)的引物，也就是一端（F或R)的引物在其5‘端加上M13引物，第一次PCR就用這個(gè)擴(kuò)增，然后以擴(kuò)增產(chǎn)物為模板，用熒光標(biāo)記的M13引物和另一端沒有標(biāo)記的（R或F）引物，再擴(kuò)增一次。效果還行。 |
3樓2015-05-11 20:16:12
吾小豆123
金蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 584
- 散金: 50
- 帖子: 38
- 在線: 106.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1995847
- 注冊(cè): 2012-09-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 原子和分子物理
4樓2015-05-11 21:43:21
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 299求調(diào)劑 +6 | △小透明* 2026-03-17 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +4 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085700資源與環(huán)境308求調(diào)劑 +12 | 墨墨漠 2026-03-18 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +6 | 想上岸的鯉魚 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿華南師大 070300（化學(xué)）304分求調(diào)劑 +3 | 0703武芊慧雪304 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 南昌大學(xué)材料專碩311分求調(diào)劑 +5 | 77chaselx 2026-03-20 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑求學(xué)校推薦 +3 | 伯樂29 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3 | 藥學(xué)chy 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿蘇州大學(xué)材料求調(diào)劑，總分315（英一） +5 | sbdksD 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 298-一志愿中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)-求調(diào)劑 +9 | 手機(jī)用戶 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +6 | lemonzzn 2026-03-16 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +3 | 妮妮ninicgb 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個(gè)二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|