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caizijin木蟲 (小有名氣)
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[交流]
細(xì)胞密度降一半，蛋白表達(dá)量不變-重組CHO細(xì)胞表達(dá)蛋白
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| 本人做重組CHO細(xì)胞表達(dá)蛋白,在3L和30L發(fā)酵罐上做發(fā)酵,采用國產(chǎn)基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng),流加培養(yǎng)基是同一公司生產(chǎn)的,3L罐采用液體流加培養(yǎng)基F1,流加培養(yǎng)基中添加300g/L 的葡萄糖，體積比F1：葡萄糖=2：1，終糖濃度117g/L，30L罐采用同樣配方的干粉流加培養(yǎng)基配制,配制過程按廠家說明書，配制過程直接添加固體葡萄糖一起溶解，終糖濃度133.3g/L，流加過程控制糖濃度，按糖消耗量預(yù)測次日糖消耗量，根據(jù)流加培養(yǎng)基糖濃度計(jì)算流加體積。最終發(fā)酵結(jié)果顯示，3L罐的最高細(xì)胞密度可達(dá)到1.5*10的7次方，而30L罐的最高細(xì)胞密度僅為3L罐的一半，但ELISA檢測蛋白含量差不多，無法解釋這個(gè)現(xiàn)象，是否有高手幫忙解答一下。 |
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 高密度發(fā)酵 |
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白木清水
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
| 這種情況說不清啊，CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染適合構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系從而生產(chǎn)大量蛋白，培養(yǎng)30L也太浪費(fèi)質(zhì)粒培養(yǎng)基啥的了吧，而且沒有菌污染么，換個(gè)293瞬轉(zhuǎn)試試，還有培養(yǎng)3L的你得到了多少蛋白？用了多少質(zhì)粒啊 30L 呢 |
7樓2015-10-20 15:45:16
8樓2015-10-29 13:18:31
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