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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 生物科學 » 蛋白/酶 » 胰蛋白酶裂解蛋白的條件？
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[求助]
胰蛋白酶裂解蛋白的條件？ 已有2人參與
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| 請教 胰蛋白酶裂解蛋白的反應條件，試了很多條件，效率都比較低？總是感覺酶的活力比較低，用的是上海生工的胰蛋白酶1:250，或者有什么這個方面參考文獻的 |
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luwei13566
木蟲 (正式寫手)
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【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數(shù) +1
atom150: 金幣+10, ★有幫助 2015-06-11 08:50:35
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atom150: 金幣+10, ★有幫助 2015-06-11 08:50:35
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1.不同來源的胰蛋白酶最適pH、最適溫度、穩(wěn)定性、金屬離子差異都很大的。LZ可以先和生工聯(lián)系搞清楚這個酶是從哪個來源得到的，然后再查找相關文獻或者說明書。 2.如果懷疑買到的胰蛋白酶的活性�？梢栽谝欢囟群蚿H下，以N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯為底物檢測253nm下吸光度的差異換算成酶活來評價一下你買的這個酶的效價和商品目錄上貼的是否在一個數(shù)量級。 3. 一般蛋白酶水解的效果在不同的底物中差異也是非常大的�？赡苣愕哪繕说鞍状_實不好處理，或者是目標蛋白上的切割位點包裹在疏水核心里面無法水解掉，不知道LZ是做什么的，對你的蛋白樣品煮沸10分鐘再用胰蛋白酶消解應該會有不錯的效果。 |
2樓2015-06-06 03:36:02
shenglin01
新蟲 (著名寫手)
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