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308047410新蟲 (小有名氣)
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RNA提取電泳圖，不知道什么原因。求原因
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采用Trizol試劑（Invitrogen，USA）提取各組織總RNA。 1） 用液氮將研缽預冷，待液氮揮發(fā)速度變慢，取適量消化腺組織（約 50mg） 放入其中，研磨組織； 2） 待樣品無明顯顆粒后轉(zhuǎn)入已加入 1mlTrizol 的 1.5ml 離心管中，混勻后，室 溫靜置 10min； 3） 在管中加入 200μl 三氯甲烷，用渦旋震蕩器劇烈震蕩 15s 后，冰上靜置 5min； 4） 以 12,000 rpm 轉(zhuǎn)速 4℃冷凍離心 15min 后，棄上清液，加入與上清液等量的 異丙醇，迅速混勻； 5） 12,000 rpm 4℃冷凍離心 20min； 6） 棄去上清液，加入 1ml 75%乙醇（現(xiàn)用現(xiàn)配），8000rpm 4℃冷凍離心 10min； 7） 棄掉上清液，然后將沉淀置于室溫晾干 5-10min，使殘余乙醇盡可能揮發(fā)， 取事先預熱 DEPC-H2O，取 30μl 溶解 RNA 沉淀。 以上是我采用 的方法，得到的電泳圖如下： 由于第一次做，請各位給予指導和 建議。 Cache_50175fbd4703b621.jpg |
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