 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1612 | 回復(fù): 12 | ||
原孟子金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
菌落pcr跟酶切 已有6人參與
|
如題，最近一直在做pcr-rflp,前幾周是轉(zhuǎn)化長不出菌來，這次好不容易長菌了，但是菌落pcr圖譜亮帶又不是很亮，又挑了一些菌試了一下，還是這樣。酶切試了一下幾乎只有兩條亮帶，跑了大約一個(gè)半小時(shí)，110V電壓，蟲子們，給點(diǎn)意見，哪里做錯(cuò)的節(jié)奏，不想再重新開始了，真的。。。都快崩潰了做實(shí)驗(yàn)做的，頭暈 612.jpg jlpcr612.jpg mq612.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有277人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 空質(zhì)粒做PCR也能P出目的條帶
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 測序正確的片段雙酶切連接表達(dá)載體，提質(zhì)粒PCR驗(yàn)證后，還需要再次測序嗎？
已經(jīng)有11人回復(fù)
- PCR產(chǎn)物與PMD18-T連接不上
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 雙酶切怎么操作才能完全徹底呢！
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 用1.5ml的EP管可以搖菌進(jìn)行菌液PCR鑒定、保菌跟抽質(zhì)粒嗎？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 菌落PCR明顯有目標(biāo)條帶，酶切驗(yàn)證卻不對，測序也沒結(jié)果
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求助：EcoRI 和 XhoI雙酶切
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 雙酶切的目的基因與質(zhì)粒連接不上怎么辦
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 酶切連接連不上，要死了
已經(jīng)有23人回復(fù)
- 請問我的菌落PCR測序產(chǎn)物目的片段是什么
已經(jīng)有23人回復(fù)
- Ecor Ⅰ和Hind Ⅲ雙酶切結(jié)果，目的條帶有，可是另一條帶比原來質(zhì)粒還要大，怎么解釋呢
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 單酶切失敗。質(zhì)粒驗(yàn)證顯示正確，但是PCR驗(yàn)證與酶切驗(yàn)證出現(xiàn)很多問題，麻煩大家解決下
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 菌落PCR有雜帶
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 如何檢測目的片段轉(zhuǎn)沒轉(zhuǎn)到質(zhì)粒上？
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 單酶切切不開的原因？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 大神救命�。�！菌液PCR 出來酶切質(zhì)粒沒有目的條帶
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 用pMD 19-T做克隆之后用哪對通用引物做菌落PCR以及測序呢？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 革蘭氏陽性菌的PCR方法
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 我用sal Ⅰ和xho Ⅰ雙酶切鏈接目的基因，菌落pcr能p出目的條帶，但酶切切不開。
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 載體上臨近的兩個(gè)酶切位點(diǎn)可以設(shè)計(jì)起來做雙酶切嗎？
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 菌落PCR多條帶，還能往后做雙酶切嗎
已經(jīng)有25人回復(fù)
- Xho1和EcoR1雙酶切，切不開
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 載體和酶切片段連接的問題
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 請教各位前輩 為什么我做菌落PCR總也P不出來
已經(jīng)有28人回復(fù)
- PCR鑒定與酶切鑒定
已經(jīng)有11人回復(fù)
名闖天下
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 3178.6
- 紅花: 1
- 帖子: 607
- 在線: 51.3小時(shí)
- 蟲號: 2453313
- 注冊: 2013-05-07
- 專業(yè): 污染生態(tài)化學(xué)
2樓2015-06-13 07:07:41
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
原孟子(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-06-15 22:54:04
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
原孟子(西門吹雪170代發(fā)): 金幣+2, 鼓勵(lì)回帖交流 2015-06-15 22:54:04
|
你的菌落PCR貌似都不對呀，無論產(chǎn)物大小，菌落PCR的帶應(yīng)該是很單一很亮才對的啊 好的菌液PCR圖是這樣的 鏈接: http://pan.baidu.com/s/1dD0Hxlf 密碼: g5qn |
3樓2015-06-13 10:59:06
原孟子
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1136.4
- 紅花: 2
- 帖子: 88
- 在線: 55.1小時(shí)
- 蟲號: 2733533
- 注冊: 2013-10-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
4樓2015-06-13 12:15:16
Tama二等兵
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 9.1
- 散金: 5
- 帖子: 48
- 在線: 26.4小時(shí)
- 蟲號: 2880712
- 注冊: 2013-12-18
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
5樓2015-06-14 10:31:58
易水秋寒
銀蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
- 金幣: 509.5
- 帖子: 39
- 在線: 38.4小時(shí)
- 蟲號: 1343375
- 注冊: 2011-07-12
- 專業(yè): 生物化學(xué)
6樓2015-06-15 16:17:04
7樓2015-06-15 18:28:57
sonyangg
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 8 (幼兒園)
- 金幣: 56.9
- 帖子: 37
- 在線: 4.8小時(shí)
- 蟲號: 2190711
- 注冊: 2012-12-17
- 專業(yè): 生物力學(xué)與生物流變學(xué)
8樓2015-06-15 23:20:36
原孟子
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1136.4
- 紅花: 2
- 帖子: 88
- 在線: 55.1小時(shí)
- 蟲號: 2733533
- 注冊: 2013-10-18
- 性別: MM
- 專業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
9樓2015-06-16 08:48:51
zhangyo
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 50.8
- 帖子: 9
- 在線: 3.8小時(shí)
- 蟲號: 609403
- 注冊: 2008-09-22
- 專業(yè): 海洋地質(zhì)學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
原孟子: 金幣+66, ★★★很有幫助 2015-06-24 11:02:45
原孟子: 金幣+66, ★★★很有幫助 2015-06-24 11:02:45
|
個(gè)人建議： 1）PCR產(chǎn)物一定要好，濃度足夠，條帶單一，可回收之后使用，盡量要新鮮。 2）酶的選擇，有的酶雖然文獻(xiàn)推薦的挺多，但不見得對所有樣品都好用，選用4堿基酶，最好有自己的測序結(jié)果，看看序列上到底有多少酶切位點(diǎn)。（你這個(gè)明顯的位點(diǎn)少，基本所有的菌都是那一兩個(gè)酶切點(diǎn)，所以切出來都一樣） 3）單切不好用是，可考慮雙切。 |
10樓2015-06-16 14:30:46
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 原孟子 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +8 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085602 307分 求調(diào)劑 +6 | 不知道叫什么！ 2026-03-26 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 298調(diào)劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 334求調(diào)劑 +3 | 雨清天晴 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 劉柯@ 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 294分080500材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +4 | 柳溪邊 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 蘆lty 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 1() 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 南京郵電大學(xué) 288分 材料考研 求調(diào)劑 +3 | jl0720 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 291 求調(diào)劑 +7 | 化工2026屆畢業(yè)?/a> 2026-03-21 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +6 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-21 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | QiMing7 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | 汪�。�！ 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 各位老師您好：本人初試372分 +5 | jj涌77 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 上海電力大學(xué)材料防護(hù)與新材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室招收調(diào)劑研究生（材料、化學(xué)、電化學(xué)，環(huán)境） +4 | 我愛學(xué)電池 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿南航材料專317分求調(diào)劑 +5 | 炸呀炸呀炸薯?xiàng)l 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[基金申請] 請教下大家 2026年國家基金申請是雙盲審嗎？ +3 | lishucheng1 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料/農(nóng)業(yè)專業(yè)，07/08開頭均可，過線就行 +3 | 呵唔哦豁 2026-03-23 | 4/200 |
|