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雙酶切的目的基因與質粒連接不上怎么辦 已有5人參與
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| 我剛剛開始做分子克隆，將雙酶切的基因片段大約1600bp與相同雙酶切的質粒進行連接，電泳顯示兩個片段都很亮，酶切反應37攝氏度，2小時。使用T4 連接酶進行16攝氏度過夜連接，設置了陽性對照（僅含空質粒），在含有抗性的平板上進行涂布，結果陽性對照組長出很多菌落，而實驗組幾乎不長菌落，長出的菌落進行菌落PCR得到的條帶也不是我所期望的，請大家?guī)蛶兔�，看我哪里出現(xiàn)了問題。 |
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gyesang: 金幣+1, 鼓勵回帖交流！ 2014-09-03 18:39:33
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你好， 可以參考一下這個帖子： http://www.gaoyang168.com/bbs/viewthread.php?tid=7727916 |
9樓2014-09-02 13:41:45
10樓2014-09-02 18:08:41
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