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sunyu65045木蟲 (初入文壇)
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[求助]
雙酶切的目的基因與質(zhì)粒連接不上怎么辦 已有5人參與
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| 我剛剛開始做分子克隆,將雙酶切的基因片段大約1600bp與相同雙酶切的質(zhì)粒進(jìn)行連接,電泳顯示兩個片段都很亮,酶切反應(yīng)37攝氏度,2小時。使用T4 連接酶進(jìn)行16攝氏度過夜連接,設(shè)置了陽性對照(僅含空質(zhì)粒),在含有抗性的平板上進(jìn)行涂布,結(jié)果陽性對照組長出很多菌落,而實(shí)驗組幾乎不長菌落,長出的菌落進(jìn)行菌落PCR得到的條帶也不是我所期望的,請大家?guī)蛶兔,看我哪里出現(xiàn)了問題。 |
榮譽(yù)版主 (知名作家)
廣庭之惘然
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專家經(jīng)驗: +106 |

木蟲 (著名寫手)
銀蟲 (小有名氣)

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