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sunyu65045木蟲 (初入文壇)
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[求助]
雙酶切的目的基因與質(zhì)粒連接不上怎么辦 已有5人參與
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| 我剛剛開始做分子克隆，將雙酶切的基因片段大約1600bp與相同雙酶切的質(zhì)粒進(jìn)行連接，電泳顯示兩個(gè)片段都很亮，酶切反應(yīng)37攝氏度，2小時(shí)。使用T4 連接酶進(jìn)行16攝氏度過夜連接，設(shè)置了陽性對照（僅含空質(zhì)粒），在含有抗性的平板上進(jìn)行涂布，結(jié)果陽性對照組長出很多菌落，而實(shí)驗(yàn)組幾乎不長菌落，長出的菌落進(jìn)行菌落PCR得到的條帶也不是我所期望的，請大家?guī)蛶兔�，看我哪里出現(xiàn)了問題。 |
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Crocodile-YK
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7樓2014-09-01 19:55:17
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3樓2014-09-01 16:33:31
wangranjun
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4樓2014-09-01 17:17:45
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