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awaken2013銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
密碼子優(yōu)化后，畢赤酵母表達(dá)活性低 已有2人參與
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最近做畢赤酵母的表達(dá)，誘導(dǎo)96h 上清的活力很低。。 一開始以為是組氨酸純化標(biāo)簽的影響，后來(lái)?yè)Q了一下位置。發(fā)現(xiàn)篩選平板上的確是有活性。 但是轉(zhuǎn)移到BMMY搖瓶（按照手冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程，也參考了同種蛋白表達(dá)的文獻(xiàn)），蛋白有表達(dá)（SDS檢測(cè)到了）但是活性依然很低。跟文獻(xiàn)上的差個(gè)幾百倍吧。。 后來(lái)一個(gè)問題一個(gè)問題的尋找，發(fā)現(xiàn)有沒有可能是密碼子優(yōu)化后，反而表達(dá)量和活性都下降了？ 由于新的基因合成還要等一段時(shí)間，上來(lái)問問各位蟲友有沒有類似的情況發(fā)生？ |
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 蛋白表達(dá)純化鑒定精華 |
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2樓2015-07-09 01:01:11
awaken2013
銅蟲 (小有名氣)
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3樓2015-07-09 08:48:33
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4樓2015-07-09 08:55:13
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