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awaken2013銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
密碼子優(yōu)化后，畢赤酵母表達(dá)活性低 已有2人參與
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最近做畢赤酵母的表達(dá)，誘導(dǎo)96h 上清的活力很低。。 一開(kāi)始以為是組氨酸純化標(biāo)簽的影響，后來(lái)?yè)Q了一下位置。發(fā)現(xiàn)篩選平板上的確是有活性。 但是轉(zhuǎn)移到BMMY搖瓶（按照手冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)流程，也參考了同種蛋白表達(dá)的文獻(xiàn)），蛋白有表達(dá)（SDS檢測(cè)到了）但是活性依然很低。跟文獻(xiàn)上的差個(gè)幾百倍吧。。 后來(lái)一個(gè)問(wèn)題一個(gè)問(wèn)題的尋找，發(fā)現(xiàn)有沒(méi)有可能是密碼子優(yōu)化后，反而表達(dá)量和活性都下降了？ 由于新的基因合成還要等一段時(shí)間，上來(lái)問(wèn)問(wèn)各位蟲(chóng)友有沒(méi)有類似的情況發(fā)生？ |
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awaken2013
銅蟲(chóng) (小有名氣)
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- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2015-07-09 08:48:33
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
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2樓2015-07-09 01:01:11
Aaqqwwaqw
木蟲(chóng) (小有名氣)
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- 專業(yè): 微生物學(xué)
4樓2015-07-09 08:55:13
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