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xianglixie3銅蟲 (小有名氣)
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pcr擴增后 電泳后條帶不對 請大俠幫忙! 已有3人參與
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下面是我的電泳圖 紅框里是我的問題條帶 基因原長是2900BP左右 PCR模板 是連了T載體的質(zhì)粒 酶切是可以獲得目的基因的 就是 紅框后面的酶切條帶 但是pCR得不到目的條帶 我重新提取了野生型的DNA 也沒有擴增出目的條帶 我用的酶有primier start 普通TAQ也沒有。。。 求解�。。。。。。。。。。。。�！1  2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg 2015.6.11 sdp37 sdp27 hmg pcr2.jpg |
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xianglixie3
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3樓2015-07-10 10:52:45
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西門吹雪170: 金幣+2, 鼓勵回帖交流 2015-07-10 21:06:29
| 你說的問題條帶是什么意思？是你的目的條帶嗎？2900bp也不算長啊，引物模板退火溫度都是要考慮的，質(zhì)粒作為模板擴增也很常見，應(yīng)該不會有問題吧（你自己看看）引物也得你自己驗證了，，可以使用hot start taq酶擴增試試看，改用熱啟動PCR的方法，高保真酶可能會讓模板降解吧 |
2樓2015-07-10 10:11:44
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4樓2015-07-10 10:54:44
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5樓2015-07-10 11:54:54
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