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曉風(fēng)眷月金蟲 (正式寫手)
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[求助]
HPLC樣品出峰與流動(dòng)相的關(guān)系 已有6人參與
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| 前段時(shí)間用HPLC做個(gè)樣品,這個(gè)樣品在水中是可溶的,在乙腈中比較難溶,然后師姐在做這個(gè)樣的時(shí)候跟我說(shuō),要把水的比例調(diào)大些,更容易出峰,此時(shí),我有點(diǎn)困惑,因?yàn)橐恢倍颊J(rèn)為在反相柱里,乙腈這種相比水來(lái)說(shuō)極性小的比例越大不是應(yīng)該更早出峰么,而在分離兩種化合物的時(shí)候,在確定用反相柱之后,出峰順序不也應(yīng)該只是跟化合物本身的極性有關(guān),而與流動(dòng)相比例是無(wú)關(guān)的么?我認(rèn)識(shí)有什么誤區(qū)么?求解 |

新蟲 (小有名氣)
商家已經(jīng)主動(dòng)聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容|
你的認(rèn)識(shí)僅停留在理論上。實(shí)際操作時(shí)也要考慮到流動(dòng)相對(duì)于物質(zhì)的溶解度。試想,如果一個(gè)物質(zhì)在流動(dòng)相中不溶解,會(huì)出峰嗎?第二,出峰順序理論上與化合物極性有關(guān),但是換不同的色譜柱可能峰位顛倒,這又作何解釋呢?所以理論是一方面,但是不可以絕對(duì)化,畢竟是實(shí)驗(yàn)科學(xué)。 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
木蟲 (正式寫手)
銀蟲 (初入文壇)
金蟲 (正式寫手)

新蟲 (小有名氣)
商家已經(jīng)主動(dòng)聲明此回帖可能含有宣傳內(nèi)容|
這個(gè)不好說(shuō),按道理,水是沒有什么洗脫能力的,在反相色譜中。樣品在乙腈中溶解度低,也不至于一點(diǎn)也不溶解吧?比如1mg/ml的溶解度可以滿足嗎?你應(yīng)該是做分析對(duì)吧?我在做分離純化時(shí)遇到很多例子,出峰后樣品在試管中析出,出峰也還正常。不過這樣確實(shí)有風(fēng)險(xiǎn)。就你的這個(gè)例子,你可以試試看,我認(rèn)為還是應(yīng)該增加乙腈的比例才能把樣品洗脫下來(lái),或者樣品在甲醇中溶解度怎樣?是否可以把有機(jī)相換成甲醇 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
新蟲 (初入文壇)
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