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曉風(fēng)眷月金蟲 (正式寫手)
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[求助]
HPLC樣品出峰與流動相的關(guān)系 已有6人參與
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| 前段時間用HPLC做個樣品，這個樣品在水中是可溶的，在乙腈中比較難溶，然后師姐在做這個樣的時候跟我說，要把水的比例調(diào)大些，更容易出峰，此時，我有點(diǎn)困惑，因?yàn)橐恢倍颊J(rèn)為在反相柱里，乙腈這種相比水來說極性小的比例越大不是應(yīng)該更早出峰么，而在分離兩種化合物的時候，在確定用反相柱之后，出峰順序不也應(yīng)該只是跟化合物本身的極性有關(guān)，而與流動相比例是無關(guān)的么？我認(rèn)識有什么誤區(qū)么？求解 |
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這個不好說，按道理，水是沒有什么洗脫能力的，在反相色譜中。樣品在乙腈中溶解度低，也不至于一點(diǎn)也不溶解吧？比如1mg/ml的溶解度可以滿足嗎？你應(yīng)該是做分析對吧？我在做分離純化時遇到很多例子，出峰后樣品在試管中析出，出峰也還正常。不過這樣確實(shí)有風(fēng)險。就你的這個例子，你可以試試看，我認(rèn)為還是應(yīng)該增加乙腈的比例才能把樣品洗脫下來，或者樣品在甲醇中溶解度怎樣？是否可以把有機(jī)相換成甲醇 [ 發(fā)自小木蟲客戶端 ] |
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