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梁贏木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
反相高效液相色譜的洗脫程序
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各位大神好！我準(zhǔn)備用離子對(duì)反相高效液相色譜對(duì)核苷酸進(jìn)行分析，查文獻(xiàn)得到的洗脫程序如下： 100%緩沖液A 5min 0--77%緩沖液B 27min 77%緩沖液B 5min 0--100%緩沖液A 1min 100%緩沖液B 10min 我第一次做這種洗脫，想請(qǐng)教各位：1.在第2、3步反應(yīng)中，只有溶液B嗎？剩余的一些百分比是水還是溶液A？2. 這種洗脫程序在島津工作站中如何設(shè)定？謝謝各位的指教。。。。。。。。。 |
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2樓2015-08-22 17:44:32
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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
梁贏: 金幣+3 2015-08-23 13:32:23
小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
梁贏: 金幣+3 2015-08-23 13:32:23
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我個(gè)人理解：前5分鐘都是100%緩沖液A；5-27min這個(gè)過(guò)程中，緩沖液B比例從0%到77%，對(duì)應(yīng)的緩沖液A就是100%減去緩沖液B的比例；而后77%的緩沖液B保持5min；后兩步的有點(diǎn)看不懂了。 前三步你在島津上設(shè)置的話，默認(rèn)是泵A，你把緩沖液A放到A泵，緩沖液就可以放到B泵。你的是二元泵還是四元泵？二元泵的話，你選擇二元高壓梯度洗脫，總流速你設(shè)置好就行了。四元泵的話，你也是設(shè)置好比例，然后在時(shí)間程序里選擇B泵的比例，按時(shí)間段填寫(xiě)就好。 |
4樓2015-08-22 23:17:04
梁贏
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5樓2015-08-23 13:32:46
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