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keyth銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
請大家看看這個(gè)SDS-PAGE的膠濃度是否合適？ 已有2人參與
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| 樣品是一種植物蛋白，分離膠濃度為12%，最右邊為低分子量marker，分子量從15kDa-99kDa。左邊都是樣品。前沿一排的顏色好藍(lán)，我懷疑不是我的樣品楊塞，而是溴酚藍(lán)的顏色。懇請各位老師幫我鑒定一下是否是膠濃度不合適或是其他原因 |
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keyth
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http://pan.baidu.com/s/1hqk2ndE 圖片一直上傳不了最后帖子都不能編輯了。。。電泳圖片上傳到網(wǎng)盤里了，麻煩您點(diǎn)擊鏈接下載一下吧。。。 |
3樓2015-09-07 11:30:36
hc-material
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沒看到圖 據(jù)描述應(yīng)該不是膠的問題。 染色液，海有脫色是否徹底。 請參考：電泳相關(guān)溶液的配置： 1、30%丙稀酰胺混合溶液（100ml）：稱取29g丙稀酰胺和1g bis丙稀酰胺，用水溶解定容到100ml，過濾，4攝氏度保存一個(gè)月。 2、 5×SDS電極緩沖液：稱取Tris base15.1g，甘氨酸94.g，SDS 5.g加dH2O定容至1000ml。 3、2×樣品緩沖液（10ml）：甘油2ml，溴酚藍(lán)0.0202g，1MTris·Cl（pH6.8）1ml巰基乙醇0.14ml，10%SDS 4ml。 4、染色液的配制（1000ml）: 用量筒分別量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸；在電子天平上稱取0.125%考馬斯亮藍(lán)R250 1.25g，再將其一一加到1000ml錐形瓶中，用蒸餾水加以補(bǔ)足至1000ml。加入的先后順序?yàn)椋嚎捡R斯亮藍(lán)R250，甲醇或者乙醇，蒸餾水，乙酸。充分混勻后進(jìn)行過濾，收集濾液備用。當(dāng)過濾速度變慢時(shí)要更換濾紙，快速過濾完，不可隔夜以免影響染色效果。 5、脫色液（1000ml）: 用量筒分別量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸、670ml蒸餾水加入燒杯中，待溶液混和均勻后加入盛脫色液的廣口瓶；備用。 |
2樓2015-09-07 10:50:05
董博士
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4樓2015-09-08 09:40:26
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5樓2015-09-08 16:57:58
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