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[求助]
請大家看看這個SDS-PAGE的膠濃度是否合適？ 已有2人參與
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| 樣品是一種植物蛋白，分離膠濃度為12%，最右邊為低分子量marker，分子量從15kDa-99kDa。左邊都是樣品。前沿一排的顏色好藍，我懷疑不是我的樣品楊塞，而是溴酚藍的顏色。懇請各位老師幫我鑒定一下是否是膠濃度不合適或是其他原因 |
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董博士
金蟲 (正式寫手)
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4樓2015-09-08 09:40:26
hc-material
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keyth: 金幣+25, ★有幫助 2015-09-09 15:29:41
沒看到圖 據(jù)描述應該不是膠的問題。 染色液，海有脫色是否徹底。 請參考：電泳相關(guān)溶液的配置： 1、30%丙稀酰胺混合溶液（100ml）：稱取29g丙稀酰胺和1g bis丙稀酰胺，用水溶解定容到100ml，過濾，4攝氏度保存一個月。 2、 5×SDS電極緩沖液：稱取Tris base15.1g，甘氨酸94.g，SDS 5.g加dH2O定容至1000ml。 3、2×樣品緩沖液（10ml）：甘油2ml，溴酚藍0.0202g，1MTris·Cl（pH6.8）1ml巰基乙醇0.14ml，10%SDS 4ml。 4、染色液的配制（1000ml）: 用量筒分別量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸；在電子天平上稱取0.125%考馬斯亮藍R250 1.25g，再將其一一加到1000ml錐形瓶中，用蒸餾水加以補足至1000ml。加入的先后順序為：考馬斯亮藍R250，甲醇或者乙醇，蒸餾水，乙酸。充分混勻后進行過濾，收集濾液備用。當過濾速度變慢時要更換濾紙，快速過濾完，不可隔夜以免影響染色效果。 5、脫色液（1000ml）: 用量筒分別量取250ml甲醇或者乙醇、80ml乙酸、670ml蒸餾水加入燒杯中，待溶液混和均勻后加入盛脫色液的廣口瓶；備用。 |
2樓2015-09-07 10:50:05
3樓2015-09-07 11:30:36
5樓2015-09-08 16:57:58
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