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xue_283

金蟲 (正式寫手)

應(yīng)助: 3 (幼兒園)
金幣: 6097.8
帖子: 569
在線: 183.6小時(shí)
蟲號: 1097035
注冊: 2010-09-12
專業(yè): 植物營養(yǎng)學(xué)

[求助] 小麥籽粒蛋白質(zhì)提取與SDS-PAGE

小弟剛剛接觸蛋白質(zhì)測定與電泳，有些問題請教各位，請大家不吝賜教啊。
問題一、
蛋白質(zhì)提取過程，提取gliadin和glutenin，方法同Wieser and Seilmeier（1998）中的方法。提取后測定gliadin和glutenin的濃度，計(jì)算后發(fā)現(xiàn)濃度分別只有大概3mg/g flour和12mg/g flour左右，可我從文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)別人測定的小麥籽粒蛋白質(zhì)gliadin和glutenin的濃度大概分別是20mg/g flour和40mg/g flour左右，我的計(jì)算過程經(jīng)過反復(fù)核對，應(yīng)該沒有問題，請問誰知道我測定的這個(gè)濃度范圍靠譜么？
問題二、
SDS-PAGE 我在做電泳的時(shí)候，由于每個(gè)樣品的蛋白質(zhì)濃度不同，但是我卻將每個(gè)樣品的上樣體積保持了一致，跑出來的膠雖然比較清晰，但是由于不同樣品之間濃度不同導(dǎo)致上樣量（蛋白質(zhì)的量）不同，因而不同樣品跑出的條帶顏色深淺略有不同，但不是很明顯。這樣的膠還可以在文章中使用么？注：我的試驗(yàn)?zāi)康钠鋵?shí)并不是定量的，本來是打算看一看不同分子量的蛋白組分所占比例的差異，因此好像不同上樣量并不影響。但是我看別人發(fā)的文章中，上樣量都是保持一致的，因此比較糾結(jié)，請各位高手指點(diǎn)。
謝謝。

回復(fù)此樓

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1樓 2012-03-26 16:20:10

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