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hxx593847830新蟲 (小有名氣)
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[求助]
真菌DNA提取問題 已有5人參與
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| 最近在做真菌18S和ITS鑒定,使用液氮研磨、試劑盒提取DNA,已經(jīng)做了一遍沒有跑出條帶。因為我是取了2ML菌液,自動研磨10min沒有提取出來,猜想可能是提取DNA量少的原因。想問一下各位,試劑盒說是取真菌100mg,真菌菌液培養(yǎng)幾天取樣較好?取樣的話取多少合適?另外,如果我用自動研磨機(jī)研磨多長時間好呢?希望有經(jīng)驗的大神指導(dǎo)!! |
真菌 |
木蟲 (小有名氣)
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哈哈,你說的這個實驗我比較熟悉。我做過,當(dāng)初我也遇到過同樣的問題。解決方法如下; 你可以將生長時間長的菌絲抽濾,用緩沖液漂洗后,在再用液氮碾磨 你也可以將生長短時間(菌體未老化)的菌液離心,用緩沖液漂洗后,再用液氮碾磨 如果這兩種方法都不行就改用酶法破壁,效果會比較好。 到由于你是要做菌種鑒定,對基因組的質(zhì)量要求不高,所以無論那種都可以 在樣菌的過程中,切記要保證沒有染雜菌 如果還有問題再聯(lián)系我 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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量少的原因的話直接pcr就可以了 。p不出來就不是量少的問題了?赡軟]有裂解開。自動研磨沒用過。提DNA液氮;蛘咂胀ㄑ心ィAе榈任锢矸椒☉(yīng)該都差不多。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
金蟲 (小有名氣)
金蟲 (小有名氣)
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把你養(yǎng)的菌抽濾,用菌絲體研磨提取做。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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