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為什么我做出來的細(xì)菌V3區(qū)通用引物338，518，PCR擴(kuò)增出來的片段是100bp?
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如題， 以下是引物序列 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG(GC夾) CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 1、1.5%的瓊脂糖，120V 30分鐘， 2、下圖是引物剛剛合成以后做的溫度PCR，中間為 MARKER 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 ，最亮的為200bp 根據(jù)灰度值確定最佳的退火溫度為62度，但是所有的溫度對(duì)應(yīng)的條帶都在100bp左右。 3、正常應(yīng)該是多大呢？是引物序列的問題嗎？ 求各位大神指點(diǎn)！萬分感謝！ 細(xì)菌V3通用引物228,518 溫度梯度PCR.jpg |
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2樓2015-10-28 22:41:14
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3樓2015-10-28 23:22:20
runye20154樓2015-10-28 23:27:39
5樓2015-10-29 07:19:50
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hardy_guo
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
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您好，請(qǐng)問您用的這個(gè)引物是參考哪個(gè)文獻(xiàn)獲得的？可否告知一下文獻(xiàn)鏈接？ 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
9樓2017-03-27 20:22:10
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