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為什么我做出來的細菌V3區(qū)通用引物338，518，PCR擴增出來的片段是100bp?
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如題， 以下是引物序列 16SrDNA 338F:CGCCCGCCGCGCGCGGCGGGCGGGGCGGGGGCACGGGGGG(GC夾) CCTACGGGAGGCAGCAG 518R:ATTACCGCGGCTGCTCC 1、1.5%的瓊脂糖，120V 30分鐘， 2、下圖是引物剛剛合成以后做的溫度PCR，中間為 MARKER 500-25BP 依次是 500 400 300 200 150 100 75 50 25 ，最亮的為200bp 根據(jù)灰度值確定最佳的退火溫度為62度，但是所有的溫度對應的條帶都在100bp左右。 3、正常應該是多大呢？是引物序列的問題嗎？ 求各位大神指點！萬分感謝！ 細菌V3通用引物228,518 溫度梯度PCR.jpg |
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9樓2017-03-27 20:22:10
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