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quanweizhuce木蟲(chóng) (小有名氣)
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[交流]
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的結(jié)果鑒定
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最近在做質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),第一次接觸有很多不懂的地方,幾個(gè)問(wèn)題想請(qǐng)教大家。![]() 背景: 將新霉素抗性的質(zhì)粒轉(zhuǎn)入金黃色葡萄球菌內(nèi)。抽提的質(zhì)粒與新制備的金葡菌感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行電轉(zhuǎn)化,結(jié)束后將菌液涂布新霉素抗性平板內(nèi),37℃培養(yǎng)4天后,只有一塊平板長(zhǎng)出2個(gè)菌落 ,經(jīng)觀察兩個(gè)菌落是金葡菌。問(wèn)題: 在論壇看了其他蟲(chóng)友關(guān)于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的評(píng)論,“抗生素的活性只能維持一段時(shí)間,常見(jiàn)的氨芐青霉素(Amp)在37℃大約能維持16小時(shí)(也就是過(guò)夜),時(shí)間太長(zhǎng)后就失效了。一般抗生素只能抑制雜菌生長(zhǎng),并不能殺死它們,所以抗生素失效之后,雜菌就能長(zhǎng)起來(lái)了! 金葡菌通常涂板24小時(shí)肯定能長(zhǎng)出來(lái),可是我轉(zhuǎn)化后涂板很久才長(zhǎng)出兩個(gè)菌落,時(shí)間是明顯延長(zhǎng)的,請(qǐng)問(wèn),新霉素的抗性也是只能維持一段時(shí)間嗎?大約多久? |
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我做的不是金葡,也可能你的感受態(tài)細(xì)胞不太好或者電轉(zhuǎn)條件不對(duì),這方面你看相關(guān)文獻(xiàn)就好了,或者你質(zhì)粒濃度不對(duì),我看你質(zhì)粒是從金葡里提出來(lái)的,質(zhì)粒濃度測(cè)過(guò)了沒(méi)?為什么不用大腸桿菌擴(kuò)增質(zhì)粒啊? 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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4天....,你確定那兩個(gè)不是雜菌嗎,怎么感覺(jué)沒(méi)轉(zhuǎn)進(jìn)去 發(fā)自小木蟲(chóng)IOS客戶端 |
銀蟲(chóng) (小有名氣)
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四天時(shí)間太長(zhǎng)了,一般過(guò)夜就長(zhǎng)起來(lái)了,那兩個(gè)很有可能是雜菌了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |

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你是怎么轉(zhuǎn)化到金葡里面的?電轉(zhuǎn)?我用過(guò)氨芐 氯霉素 卡那霉素和紅霉素的篩選,一般轉(zhuǎn)化成功的五到六個(gè)小時(shí)都能長(zhǎng)出來(lái),最多過(guò)夜也長(zhǎng)出來(lái)了 發(fā)自小木蟲(chóng)Android客戶端 |
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