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[交流]
western有雜帶怎么回事？ 已有4人參與
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一抗是生工的his抗體，做的是原核表達的蛋白，二抗用的熒光標記，有雜帶怎么回事？ 1.jpg |
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forcechen
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2樓2015-12-05 12:20:54
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
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|
Western blot結果中雜帶較多 可能的原因及建議 1.一抗是多抗。 2.一抗特異性不高——重新選擇或制備高特異性的抗體。 3.樣本處理過程中目的蛋白發(fā)生降解——加入蛋白酶抑制劑；樣本處理時在冰上操作 4.目的蛋白有其它剪切本——查閱文獻或生物信息學分析可能性。 5.上樣量過高，太敏感——適當減少上樣量。 具體可以看看蛋白表達純化＞Wsetern Blot的常見問題 |
7樓2015-12-07 10:04:08
3樓2015-12-06 11:47:18
4樓2015-12-06 13:06:58
forcechen
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5樓2015-12-06 13:23:33
 本帖僅樓主可見 |
6樓2015-12-07 05:38:05
8樓2015-12-07 12:38:16
9樓2015-12-07 12:38:49
10樓2015-12-07 12:39:18
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