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xiximary鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
RT-PCR引物求助 已有1人參與
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| 我做RT-PCR時(shí)，參照基因特異性很好，就是目的基因總有一條非特異性條帶，重新設(shè)計(jì)引物，調(diào)退火溫度怎么也去除不了�？淳W(wǎng)上說(shuō)要橫跨內(nèi)含子，不知怎么找基因的內(nèi)含子和外顯子？我是在NCBI上找到基因的序列設(shè)計(jì)的引物，這里是mRNA，應(yīng)該沒(méi)有內(nèi)含子。我看網(wǎng)上報(bào)道RT-PCR產(chǎn)物片段最好在200bp以內(nèi)。我是新手，請(qǐng)問(wèn)該怎么設(shè)計(jì)這種引物才能成功？還有好多不懂的東西，望各位專家賜教，非常感謝。 |
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2樓2015-12-21 18:28:36
xiximary
鐵桿木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 10457.6
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- 蟲號(hào): 490454
- 注冊(cè): 2008-01-03
- 專業(yè): 呼吸系統(tǒng)免疫性疾病及變應(yīng)
3樓2015-12-21 20:14:47
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4樓2017-08-21 03:16:32
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