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xiximary鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
RT-PCR引物求助 已有1人參與
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| 我做RT-PCR時(shí),參照基因特異性很好,就是目的基因總有一條非特異性條帶,重新設(shè)計(jì)引物,調(diào)退火溫度怎么也去除不了?淳W(wǎng)上說要橫跨內(nèi)含子,不知怎么找基因的內(nèi)含子和外顯子?我是在NCBI上找到基因的序列設(shè)計(jì)的引物,這里是mRNA,應(yīng)該沒有內(nèi)含子。我看網(wǎng)上報(bào)道RT-PCR產(chǎn)物片段最好在200bp以內(nèi)。我是新手,請(qǐng)問該怎么設(shè)計(jì)這種引物才能成功?還有好多不懂的東西,望各位專家賜教,非常感謝。 |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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