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zoe回望鐵桿木蟲 (正式寫手)
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[求助]
真菌PCR沒有條帶，求大神相助！ 已有2人參與
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我才開始做DNA提取，提的是霉菌一類的，總DNA有條帶，看得見，但是PCR之后沒有條帶。 引物用的是its1和its4（老師在上海生工買的，its1的Tm值是61.9攝氏度，its4的Tm值是55.8攝氏度），用的是mix，一共50ul，模板2ul，mix25ul，引物各1ul，用滅菌超純水不足50ul。 程序1是：93度，3min； 94度，1min；52度,1min;72度，1.5min（35個循環(huán)） 72度，10min。 程序2是：45度，10min； 94度，1min；57度,45s;72度，1min（35個循環(huán)） 72度，10min。 這個兩個程序我都沒有任何條帶，求有經(jīng)驗的大神指導！萬分感謝�。� |
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