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ygw198781新蟲 (初入文壇)
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[求助]
真菌I型PKS基因PCR出現(xiàn)非特異性條帶 已有1人參與
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3對引物：KAF1/KAR1、KAF1/KAR2、LC1/LC2C KAF1（5’-GAR KSI CAY GGI ACI GGI AC-3’）； KAR1（5’-CCA YTG IGC ICC RTG ICC IGA RAA-3’）； KAR2（5’-CCA YTG IGC ICC YTG ICC IGT RAA-3’）； LC1（5’-GAY CCI MGI TTY TTY AAY ATG-3’）； LC2C（5’-GTI CCI GTI CCR TGC ATY TC-3’） PCR條件（50μ） 95℃ 4min； 95℃ 30s 50℃ 1min 35個cycle 72℃ 2min 72℃ 10min； PCR結(jié)果條帶應(yīng)該在800bp左右，可實際結(jié)果在800bp左右卻有好幾條條帶，位置非常相近，幾乎連在一起，無法回收。想問一下大俠們，是PCR條件有問題還是這個菌本身就沒有這個片段？ 圖片2.gif |
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2樓2017-04-05 10:51:57
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