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wuhao4850103銀蟲 (著名寫手)
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[交流]
熒光定量PCR擴(kuò)增后溶解曲線出現(xiàn)雜峰
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| 本人最近在做熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，用的引物和以前的一樣，只是cDNA模板不同，但是最近實(shí)驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)擴(kuò)增后的溶解曲線出現(xiàn)了或大或小的雜峰，以前用這些引物擴(kuò)增的時(shí)候溶解曲線里面基本上沒有雜峰。所以，我想會(huì)不會(huì)是由于每次做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候都要把稀釋后的引物從負(fù)20度拿出來，然后融化一部分，結(jié)果引物反復(fù)凍融以后造成了這種現(xiàn)象，引物反復(fù)凍融會(huì)影響其擴(kuò)增的特異性嗎？ |
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2樓2016-11-28 21:52:03
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CT值多大？如果樣品濃度太少的話會(huì)出現(xiàn)菲特異性擴(kuò)增 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
3樓2016-11-29 00:01:04
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會(huì)不會(huì)樣品降解了 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
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9樓2016-12-01 13:16:10
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ct值去到35,肯定就是這個(gè)模版的這個(gè)基因濃度太低了，模版濃度高一般不會(huì)出現(xiàn)這種問題 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2016-12-01 18:39:18
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