 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2487 | 回復(fù): 18 | ||
18366882927新蟲 (初入文壇)
|
[求助]
之前做過的PCR重復(fù)不出來，求大神幫忙看一下？？急！急！急！不然就得換導(dǎo)師了。 已有3人參與
|
|
|
這是設(shè)計的大腸桿菌DH5α引物 F：5，CGCGGATCCATGGCTGTTACTAATGTCG 3， R：5，CCGCTCGAGTTAAGCGGATTTTTTCG 3， PCR體系（25ul): 模板 ： 2ul Taq酶 ： 0.125ul primer : 0.625ul ：0.625ul 10xbuffer : 2.5ul 2.5mMdNTP : 2ul dd水 ： 17.125ul 條件：1. 95℃ 4min 2. 95℃ 40s 61℃ 30s 72℃ 3min 3. 72℃ 10min 這是體系和條件，求大神幫忙，幫我找找原因，要崩潰了。。。。。  年前普通Taq酶P的條帶.png 年前高保真酶primer starP出的條帶.png 年后普通taq酶P的，沒有條帶.png 1.jpg 2.jpg |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有280人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設(shè)計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- PCR之前一直有目的條帶，在重復(fù)做的時候突然就沒有目的條帶了，求助�。�
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 畢赤酵母在篩選板上長的很好，但是PCR鑒定不出來是怎么回事？
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 急急急，熒光定量PCR引物及擴增效率求助~~~~~~~~~~~~~~~~
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 實時熒光定量pcr的一些問題
已經(jīng)有0人回復(fù)
- 熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理——SD值及方差分析
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 各種生物的資料 肯定也有你喜歡的
已經(jīng)有25人回復(fù)
- PCR的可重復(fù)性
已經(jīng)有27人回復(fù)
- pcr實驗相關(guān)
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 極糾結(jié)！求高手高手高高手��！實時熒光PCR擴增正常，為何跑膠始終彌散？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- PCR求助
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 【原創(chuàng)之八】好的文獻閱讀習(xí)慣能進一步促進文獻篩選 【原創(chuàng)非收發(fā)】
已經(jīng)有31人回復(fù)
- 【原創(chuàng)】原創(chuàng)之七：【圖文】系統(tǒng)進化樹的構(gòu)建及編輯【已搜索無重復(fù)】
已經(jīng)有377人回復(fù)
- 【原創(chuàng)】原創(chuàng)之六：環(huán)境樣品總DNA的提取與純化【已搜索無重復(fù)】
已經(jīng)有178人回復(fù)
★
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-03-28 07:43:53
西門吹雪170: 金幣+1, 鼓勵回帖交流 2017-03-28 07:43:53
|
首先可以將模板跑個電泳看下模板是否被降解，其次稍微降低一下你的退火溫度，降至55度，并提高下循環(huán)數(shù)，如33個循環(huán)，看看是否有目的片段擴增出來，如果有，將片段切下來純化之后再當(dāng)模板做一次pcr 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
6樓2017-03-28 00:43:17
科學(xué)小覃
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 2426.9
- 散金: 100
- 紅花: 8
- 帖子: 725
- 在線: 86.1小時
- 蟲號: 3126634
- 注冊: 2014-04-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
3樓2017-03-27 17:28:06
張凡云
至尊木蟲 (職業(yè)作家)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 13417.9
- 散金: 3094
- 紅花: 13
- 帖子: 4109
- 在線: 1484.9小時
- 蟲號: 2426111
- 注冊: 2013-04-19
- 專業(yè): 生物物理、生物化學(xué)與分子
4樓2017-03-27 20:41:53
7樓2017-03-28 10:14:15
18366882927
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 74.6
- 帖子: 35
- 在線: 7.1小時
- 蟲號: 5272896
- 注冊: 2016-11-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 食品科學(xué)
2樓2017-03-27 16:56:13
凌樹枯草
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 28.5
- 帖子: 5
- 在線: 5.5小時
- 蟲號: 2904720
- 注冊: 2013-12-30
- 專業(yè): 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
5樓2017-03-27 20:42:09
傷逝1990
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1110.8
- 散金: 210
- 紅花: 1
- 帖子: 210
- 在線: 39.6小時
- 蟲號: 3989841
- 注冊: 2015-07-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 作物種質(zhì)資源與遺傳育種學(xué)
8樓2017-03-28 13:45:14
fanray110
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 2346.2
- 散金: 402
- 紅花: 3
- 帖子: 444
- 在線: 41.9小時
- 蟲號: 2342166
- 注冊: 2013-03-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 昆蟲學(xué)
9樓2017-03-28 13:47:52
18366882927
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 74.6
- 帖子: 35
- 在線: 7.1小時
- 蟲號: 5272896
- 注冊: 2016-11-23
- 性別: MM
- 專業(yè): 食品科學(xué)
|
模板是菌液，過夜搖和復(fù)搖的，應(yīng)該問題不大，昨天我同學(xué)幫我p的，p出來了，我現(xiàn)在懷疑是不是酶的問題。 發(fā)自小木蟲Android客戶端 |
10樓2017-03-29 10:11:32
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 18366882927 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 306求0703調(diào)劑一志愿華中師范 +7 | 紙魚ly 2026-03-21 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +3 | yanzhixue111 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
[考研] 070300化學(xué)求調(diào)劑 +8 | 苑豆豆 2026-03-20 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +6 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海交大生物與醫(yī)藥專碩324分，求調(diào)劑 +5 | jiajunX 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] 急發(fā)核心期刊論文 +3 | 賢達問津 2026-03-23 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 08工學(xué)調(diào)劑 +7 | 用戶573181 2026-03-20 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 350求調(diào)劑 +6 | weudhdk 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +12 | 申子申申 2026-03-19 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +4 | 幸運的醬醬 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +7 | 懷瑾握瑜l 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | Auroracx 2026-03-22 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑（有工作經(jīng)驗） +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +6 | www_q 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 22408 344分 求調(diào)劑 一志愿 華電計算機技術(shù) +4 | solanXXX 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +4 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)求調(diào)劑 +4 | Stella_Yao 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 招收調(diào)劑碩士 +4 | lidianxing 2026-03-19 | 12/600 |
|
|
|
[論文投稿]
申請回稿延期一個月，編輯同意了。但系統(tǒng)上的時間沒變，給編輯又寫郵件了，沒回復(fù)
 10+3
|
wangf9518 2026-03-17 | 4/200 |
|