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[交流]
【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因 已有14人參與
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| 大家好,我構(gòu)建表達(dá)載體連接PET-28A,已經(jīng)連接多次但都失敗,感受態(tài)細(xì)胞也換了幾次,鑒定全是假陽(yáng)性,這可能是什么原因呢,希望大家多多幫忙! |
至尊木蟲(chóng) (文壇精英)

木蟲(chóng) (著名寫手)
| 你用的是藍(lán)白篩選嗎?如果是藍(lán)白篩選,那么選的白斑就絕對(duì)不是空載,而是連接的片段太小,你沒(méi)有看到而已,所以我有可能是質(zhì)粒污染。但是污染也不可能沒(méi)有陽(yáng)性,那你沒(méi)有陽(yáng)性,很有可能還是連接的問(wèn)題,沒(méi)有連上是最大的原因。你連接的片段是PCR產(chǎn)物,還是膠回收產(chǎn)物,還是其他什么片段,濃度怎么樣,長(zhǎng)度多大 |
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