 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2742 | 回復(fù): 27 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
zhangwuhui銅蟲 (小有名氣)
|
[交流]
【求助/交流】基因克隆實(shí)驗(yàn)為非目的片段？ 已有16人參與
|
||
|
克隆實(shí)驗(yàn)問題 1、以cDNA為模板做PCR反應(yīng)，得到的產(chǎn)物和預(yù)期的長度一樣。 2、再用pMD-19載體連接目的片段，之后液體LB（含氨芐）200轉(zhuǎn)震蕩培養(yǎng)1-2小時(shí)，取300微升倒在LB平板培養(yǎng)24小時(shí)左右，以陽性菌落長到直徑1-2毫米為止；再挑3-5個(gè)陽性單克隆放大培養(yǎng)24小時(shí)左右。 3、裂解菌體，4°C ，12 000 g ，離心20-30分鐘，得到質(zhì)粒。 4、PCR檢測所得質(zhì)粒（引物為M13-47, RV-M），得到了目的片段大小的產(chǎn)物（稍長些）。 5、送質(zhì)粒測序（使用通用引物M13-47），但是測序結(jié)果卻是如下其概況：在載體插入點(diǎn)之間的序列BLAST后，顯示為桿菌等細(xì)菌的片段，共送了10個(gè)樣品均是如此（本實(shí)驗(yàn)應(yīng)該是動物的序列），看來不是空載，難道是載體連接上了細(xì)菌的一段序列，為什么會插入細(xì)菌片段呢，而且長度就這么巧！還是其他什么原因呢，懇請賜教！ [ Last edited by zhangwuhui on 2010-7-29 at 18:31 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有111人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 重金求助基因克隆與功能驗(yàn)證方向 中文摘要350字左右翻譯成英語 急！ 急！ 急！在線等
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 如何從基因組中擴(kuò)增出一長5kb的片斷進(jìn)行克隆
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 大片段基因克隆
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 請問能不能僅克隆單一基因的一小片段
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 基因克隆問題~~
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】基因克隆實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】求助：做基因克隆表達(dá)的時(shí)候，怎么選基因？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】基因做表達(dá)實(shí)驗(yàn)必須要克隆全長嗎？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】基因克隆
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因克隆總不成功
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】只知道基因功能，但不知序列位置，怎樣克隆目的基因
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】求助基因克隆方面的問題解決方案
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于目的基因的克隆
已經(jīng)有12人回復(fù)
9樓2010-07-27 15:53:42
sunyongle1
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2638.8
- 散金: 1
- 帖子: 413
- 在線: 103.8小時(shí)
- 蟲號: 1059232
- 注冊: 2010-07-17
- 專業(yè): 腫瘤發(fā)生
2樓2010-07-25 21:02:34
jhon86
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1259.8
- 散金: 47
- 帖子: 87
- 在線: 191.3小時(shí)
- 蟲號: 896554
- 注冊: 2009-11-07
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物醫(yī)用高分子材料
3樓2010-07-25 23:03:21
yujiaping1
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1365.2
- 散金: 10
- 紅花: 5
- 帖子: 1174
- 在線: 66.6小時(shí)
- 蟲號: 929883
- 注冊: 2009-12-17
- 性別: MM
- 專業(yè): 疫苗學(xué)
4樓2010-07-25 23:28:53
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求調(diào)劑，一志愿 南京航空航天大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分 +8 | @taotao 2026-03-29 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 288資源與環(huán)境專碩求調(diào)劑，不限專業(yè)，有學(xué)上就行 +8 | lllllos 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二 +18 | leaflight 2026-03-24 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +3 | 什么是胖頭魚 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085404求調(diào)劑，總分309，本科經(jīng)歷較為豐富 +6 | 來財(cái)aa 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 294分080500材料科學(xué)與工程求調(diào)劑 +8 | 柳溪邊 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +5 | BrightLL 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +10 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 279求調(diào)劑 +4 | 蝶舞輕繞 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 298求調(diào)劑 +4 | 種圣賜 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 305求調(diào)劑 +8 | RuiFairyrui 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +14 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海理工能源動力（085800）310分求調(diào)劑 +3 | zhangmingc 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 272求調(diào)劑 +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 348求調(diào)劑 +4 | 小懶蟲不懶了 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +10 | 呼呼？~+123456 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|