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dreamshaker

銅蟲 (正式寫手)

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[交流] 【求助/交流】看一下我做的蛋白質(zhì)是不是變性了

我做的是從提取動(dòng)物肝臟中的細(xì)胞色素c，在最后一步三氯乙酸處理離心后有白色沉

淀，除去了部分的清液，大概有三分之二，因?yàn)橐鐾肝觯肝龃萘坑邢蘧蜎](méi)有加

去離子水，透析過(guò)夜后發(fā)現(xiàn)有些渾濁的白絮狀不均勻存在，不知道是不是已經(jīng)變性

了，老師說(shuō)三氯乙酸的變性沉淀是可逆的，有好些同學(xué)做的是深紅色沉淀極少，我的

淺紅色，是不是也可能存在濃度太大析出的可能呢？

我測(cè)了520nm，吸光度比其他組做的要大很多，蛋白質(zhì)變性以后是不是在比較寬的區(qū)

間內(nèi)比如100nm的跨度吸光度的增長(zhǎng)都會(huì)很明顯啊，還是只在原有的最強(qiáng)吸光度上有

所增加呢？

[ Last edited by dreamshaker on 2011-3-14 at 20:27 ]

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1樓 2011-03-12 22:48:04

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wqj1988926

金蟲 (正式寫手)

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dreamshaker(金幣+2): 2011-03-14 20:22:47
dreamshaker(金幣+2): 2011-03-14 21:00:58

是不是濃度太大導(dǎo)致蛋白析出，還有樓主的儲(chǔ)存條件最好說(shuō)明一下，給大家參考下

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5樓2011-03-13 09:41:51

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dreamshaker

銅蟲 (正式寫手)

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我暈，這個(gè)問(wèn)題很難嗎？

引用回帖:

Originally posted by dreamshaker at 2011-03-12 23:07:36:
謝謝了

真的很難嗎？

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3樓2011-03-12 23:24:50

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zhengfan1109

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dreamshaker(金幣+2): 2011-03-14 20:23:05
dreamshaker(金幣+2): 2011-03-14 20:58:39

你可以測(cè)定離心之后和不離心的蛋白活性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果出來(lái)才知道活性還存在沒(méi)有。

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4樓2011-03-13 00:28:37

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labrat

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dreamshaker(金幣+1): 我測(cè)的是細(xì)胞色素c，用可見(jiàn)光分光測(cè)的 2011-03-14 20:24:45
dreamshaker(金幣+2): 2011-03-14 21:01:45

general guide:
1. test A260/280/254nm (280> better)
2. test active (protein active good)
3. test microb (contaminated with microb, better discard)

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6樓2011-03-13 10:07:43

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