 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門(mén)版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (559)
- >蟲(chóng)友互識(shí) (38)
- >考研 (23)
- >導(dǎo)師招生 (17)
- >休閑灌水 (8)
- >基金申請(qǐng) (5)
- >考博 (5)
- >論文投稿 (4)
- >招聘信息布告欄 (3)
- >碩博家園 (2)
- >化工設(shè)備 (1)
- >外文書(shū)籍求助 (1)
- >文獻(xiàn)求助 (1)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2173 | 回復(fù): 18 | ||
wkl1984金蟲(chóng) (小有名氣)
|
[求助]
ＲＴ－ＰＣＲ問(wèn)題求助
|
|
做反轉(zhuǎn)錄，按照生工的AMV一步反轉(zhuǎn)錄試劑盒的具體內(nèi)容操作，但是試劑盒不建議用隨機(jī)六聚體引物擴(kuò)增，我正好用隨機(jī)六聚體引物擴(kuò)增了，擴(kuò)增的結(jié)果如下，1為1000kb的marker，2 為ＲＴ－ＰＣＲ產(chǎn)物，marker好像有問(wèn)題。擴(kuò)增條件為 預(yù)變性45° 30min,PCR擴(kuò)增94° 15s ,60° 30s,72° 1min,40個(gè)循環(huán)，終延伸為72°1min。另外，模板ＤＮＡ的量加了3微升，總模板DNA小余1微克。其余按照試劑盒操作。特異性差一點(diǎn)，請(qǐng)大家給出建議 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有116人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助！關(guān)于RT-PCR的問(wèn)題！
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 向RTPCR高手求助，關(guān)于RTPCR的空白對(duì)照問(wèn)題
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量PCR與半定量的RT－PCR在設(shè)計(jì)引物時(shí)有什么區(qū)別？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR羊3K基因
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】做過(guò)RT-PCR的請(qǐng)進(jìn)
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 關(guān)于SYBR半定量熒光定量PCR的問(wèn)題求助
已經(jīng)有2人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR ，內(nèi)參在哪個(gè)步驟添加以及marker何時(shí)使用及確定？謝謝
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】做培養(yǎng)細(xì)胞的RT-PCR，β-actin內(nèi)參出現(xiàn)兩個(gè)條帶，求原因。
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】引物Tm值很高，PCR求助
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-real time pcr問(wèn)題
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR總是得不到目的條帶
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】Real time RT-PCR 引物設(shè)計(jì)問(wèn)題（高懸賞請(qǐng)高手幫忙）
已經(jīng)有28人回復(fù)
新人小玥
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 3203.8
- 散金: 87
- 紅花: 8
- 帖子: 451
- 在線: 144.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 704924
- 注冊(cè): 2009-02-20
- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
2樓2011-05-01 09:04:15
wkl1984
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 806.3
- 散金: 4
- 帖子: 240
- 在線: 103.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 912480
- 注冊(cè): 2009-11-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
3樓2011-05-01 09:09:51
新人小玥
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 3203.8
- 散金: 87
- 紅花: 8
- 帖子: 451
- 在線: 144.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 704924
- 注冊(cè): 2009-02-20
- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
4樓2011-05-01 09:44:33
wkl1984
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 806.3
- 散金: 4
- 帖子: 240
- 在線: 103.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 912480
- 注冊(cè): 2009-11-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
5樓2011-05-01 10:46:42
新人小玥
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 3203.8
- 散金: 87
- 紅花: 8
- 帖子: 451
- 在線: 144.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 704924
- 注冊(cè): 2009-02-20
- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
6樓2011-05-01 20:35:01
wkl1984
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 806.3
- 散金: 4
- 帖子: 240
- 在線: 103.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 912480
- 注冊(cè): 2009-11-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
7樓2011-05-02 16:31:56
新人小玥
木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 17 (小學(xué)生)
- 金幣: 3203.8
- 散金: 87
- 紅花: 8
- 帖子: 451
- 在線: 144.4小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 704924
- 注冊(cè): 2009-02-20
- 專業(yè): 林木遺傳育種學(xué)
8樓2011-05-02 20:59:06
yangqq8282
鐵蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 4 (幼兒園)
- 金幣: 34.5
- 帖子: 18
- 在線: 6.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 646819
- 注冊(cè): 2008-11-05
- 性別: GG
- 專業(yè): 藥物分析
9樓2011-05-03 10:28:59
wkl1984
金蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 806.3
- 散金: 4
- 帖子: 240
- 在線: 103.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 912480
- 注冊(cè): 2009-11-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化學(xué)
★ ★
dhd997(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-05-06 08:45:06
dhd997(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-05-06 08:45:06
|
擴(kuò)增條件為 預(yù)變性45° 30min,PCR擴(kuò)增94° 15s ,60° 30s,72° 1min,40個(gè)循環(huán)，終延伸為72°1min。反應(yīng)體系為ddH2o 19微升，2×RT-PCR Buffer 25微升，AMV Rt/taq Mix 1微升，隨機(jī)六聚體引物 2微升，模板DNA 3微升，總體積 50微升。引物為隨機(jī)六聚體引物，購(gòu)買(mǎi)于Takara，配置濃度為0.2微摩爾每升。預(yù)測(cè)得到的PCR的序列長(zhǎng)度為400-500bp，具體的序列我沒(méi)有找到，只是按照構(gòu)建svFv的操作手冊(cè)和參考文獻(xiàn)進(jìn)行，可是為什么文獻(xiàn)上都不給出CDNA的結(jié)果？?jī)H給出了通過(guò)cDNA擴(kuò)增出VH和VL的片段，其中VH和VL的片段大約為350bp,VH的片段為397bp,VL的片段為330bp.并且資料提供說(shuō)按照cDNA合成試劑盒操作。 |
10樓2011-05-04 10:06:25
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 wkl1984 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +8 | 隔壁陳先生 2026-03-12 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +8 | llllkkkhh 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑，英語(yǔ)六級(jí)551，有科研經(jīng)歷 +3 | 生物工程調(diào)劑 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +7 | Liwangman 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 【同濟(jì)軟件】軟件（085405）考研求調(diào)劑 +3 | 2026eternal 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工 +5 | 安全上岸！ 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限 +5 | share_joy 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級(jí)已過(guò)，有科研經(jīng)歷 +10 | 曦熙兮 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研]
 0854，計(jì)算機(jī)類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +5 | 煙火先于春 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +5 | 上岸的小葡 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +8 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考博] 26申博 +4 | 八旬速覽 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿，福州大學(xué)材料專碩339分求調(diào)劑 +3 | 木子momo青爭(zhēng) 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料與化工319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調(diào)劑一志愿 985 總分 295 +8 | dream…… 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調(diào)劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料301分求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學(xué)學(xué)碩310找調(diào)劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|