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蘿卜絲兒木蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助!轉(zhuǎn)質(zhì)粒出現(xiàn)問題了!
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從公司買來了一段基因(3.7kb),那段基因是連在公司提供的質(zhì)粒(2.7KB+3.7kb)上的,然后拿回來后就轉(zhuǎn)入E.coli,然后就是擴(kuò)增,提質(zhì)粒,酶切跑電泳,切膠回收(3.7kb),再把那個基因連到我們實(shí)驗(yàn)室自己構(gòu)建的載體(7.3kb)上,然后再做E.coli轉(zhuǎn)化,但是很妖的事情發(fā)生了!涂版以后,挑取長出來的單克隆,擴(kuò)增,提質(zhì)粒,酶切鑒定,得出的結(jié)果是3.7kb+2.7kb。。。做了好多好多遍都是這個結(jié)果,然后還用了菌落pcr鑒定那個質(zhì)粒上的基因,結(jié)果是正確的。。這到底是怎么回事啊?![]() ![]() 求各位幫忙啊。師兄一開始認(rèn)為我實(shí)驗(yàn)技能不過關(guān),然后自己上來做,也是這個情況,其他博后過來指導(dǎo),結(jié)果也是這個,這到底是怎么回事?去磷酸化也做過了,但還是這個情況。。。 |

銅蟲 (初入文壇)

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