 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3039 | 回復(fù): 6 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
yaomoon新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
熒光定量PCR與普通PCR產(chǎn)物不一樣？
|
|
|
我做熒光定量PCR,用Oligo6 設(shè)計(jì)的基因引物，擴(kuò)增片段長(zhǎng)度為91bp, 擴(kuò)增產(chǎn)物的Tm值79.9。我先用普通PCR進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增條件為94℃,5min; 94℃.30s, 60℃ 30s, 72℃ 30s; 35個(gè)循環(huán)； 72℃ 10min。擴(kuò)增的產(chǎn)物電泳檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)有200多bp并且只有一條帶（具體圖沒(méi)有拍下來(lái)）。但是我同樣的引物在熒光定量pcr儀上擴(kuò)增其溶解曲線的Tm值為79℃多一點(diǎn)，基本與我設(shè)計(jì)的一致。具體圖見(jiàn)附件。（其中熒光定量的擴(kuò)增條件與普通PCR不太一樣，我是采用的Takara試劑盒說(shuō)明書上的兩步法）。請(qǐng)問(wèn)這是怎么一回事？ 本人知道怎么發(fā)金幣，請(qǐng)版主代勞發(fā)給前20位回答問(wèn)題的蟲友。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有220人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 熒光定量PCR擴(kuò)增效率怎么做？？？？我要被逼瘋了
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 熒光定量PCR cDNA怎么定量�。�
已經(jīng)有12人回復(fù)
- RNA出現(xiàn)降解，還能做后面的熒光定量PCR嗎？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 熒光定量PCR
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量PCR與半定量的RT－PCR在設(shè)計(jì)引物時(shí)有什么區(qū)別？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量PCR中用的 SRBY Green I與電泳上用的是一樣的嗎？還是不同類型?/a>
已經(jīng)有3人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量pcr求助
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】普通PCR和熒光實(shí)時(shí)定量PCR為何結(jié)果不同？
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR簡(jiǎn)介
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于熒光定量PCR的小問(wèn)題,請(qǐng)高手指點(diǎn) 【問(wèn)題已解決】
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量PCR？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（二）
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【分享】熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)指南（一）
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光定量pcr
已經(jīng)有11人回復(fù)
cdl007
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 41
- 應(yīng)助: 46 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.025
- 金幣: 2570.6
- 紅花: 11
- 帖子: 545
- 在線: 123.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 275133
- 注冊(cè): 2006-08-27
- 專業(yè): 腫瘤病因
3樓2011-07-24 10:49:23
空谷幽風(fēng)
金蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 32
- 應(yīng)助: 13 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.05
- 金幣: 1106.1
- 散金: 500
- 紅花: 13
- 帖子: 615
- 在線: 116.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 714271
- 注冊(cè): 2009-03-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-07-24 19:28:10
yaomoon(金幣+3): 謝謝您的回帖，我會(huì)再進(jìn)行核對(duì)，并進(jìn)一步比較Q-PCR和普通PCR的電泳結(jié)果。 2011-07-25 20:39:55
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-07-24 19:28:10
yaomoon(金幣+3): 謝謝您的回帖，我會(huì)再進(jìn)行核對(duì)，并進(jìn)一步比較Q-PCR和普通PCR的電泳結(jié)果。 2011-07-25 20:39:55
|
1.你設(shè)計(jì)的引物本來(lái)應(yīng)該擴(kuò)出91bp但你擴(kuò)的產(chǎn)物是200多bp，并且從你的溶解曲線圖上可以看出你設(shè)計(jì)的引物特異性非常好，所以請(qǐng)你確認(rèn)你的原始模板信息是否完全正確。 2.既然你做普通PCR和q-pcr用的引物及模板是完全一樣的，那么擴(kuò)增的片段是完全一樣的 |
2樓2011-07-24 10:06:58
cdl007
木蟲 (正式寫手)
- MolEPI: 41
- 應(yīng)助: 46 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.025
- 金幣: 2570.6
- 紅花: 11
- 帖子: 545
- 在線: 123.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 275133
- 注冊(cè): 2006-08-27
- 專業(yè): 腫瘤病因
4樓2011-07-24 10:51:35
yaomoon
新蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 283.4
- 帖子: 68
- 在線: 72.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1049632
- 注冊(cè): 2010-06-30
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
5樓2011-07-25 20:45:06
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +7 | 楒桉 2026-03-28 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 調(diào)劑310 +8 | 溫柔的晚安 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿211 初試270分 求調(diào)劑 +8 | 谷雨上岸 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +4 | @MZB382400 2026-03-28 | 4/200 |
|
|
|
[材料工程] 一志愿C9材料與化工專業(yè)總分300求調(diào)劑 +8 | 曼111 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑推薦 材料 304 +15 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿華東理工大學(xué)081700，初試分?jǐn)?shù)271 +6 | kotoko_ik 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 | Russ_ss 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +4 | 李木子啊哈哈 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +7 | prayer13 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)339材料與化工求調(diào)劑 +3 | 江往賣魚 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求調(diào)劑 +4 | gdlf9999 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)院校調(diào)劑 +4 | 周56 2026-03-24 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 研研，接電話 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑一志愿武漢理工大學(xué)材料工程（085601） +5 | WW.' 2026-03-23 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|