 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2218 | 回復(fù): 7 | ||
chenzhenwei0銅蟲 (小有名氣)
|
[求助]
關(guān)于斑點(diǎn)檢測抗體來源，做免疫印跡做不下去了，會(huì)不會(huì)是一抗出問題了？
|
|
我用的二抗是HRP標(biāo)記的兔抗牛，但是一抗最初說是牛源的，但是后來感覺不太可靠，實(shí)驗(yàn)怎么都沒有結(jié)果。目前通過試劑說明知道一抗可能是牛、兔、羊的，后來想到用DOT實(shí)驗(yàn)來檢測血清來源以進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，因此有買了二抗兔和羊的（由于一抗不好買其他的），但是經(jīng)過幾次的發(fā)現(xiàn)，羊的二抗有顯色反應(yīng)，但是也不很明顯, 以下是我的操作方法，請高手指教，謝謝了哈 第一步：將標(biāo)準(zhǔn)陽性血清分別滴于三小塊NC膜中央，使充分干燥,蛋白完全粘附與NC膜上，約1h。 第二步： 分別將膜放置于封閉盒中，用20ml含5%脫脂奶粉的PBST封閉1h，傾去封閉液，用PBST對膜稍作漂洗1次30s 第四步： 分別于膜中央滴加二抗辣根辛過氧化物標(biāo)記的兔抗牛、兔抗羊、羊抗兔40ul, 再用含1%脫脂奶粉的PBST進(jìn)行孵育1h,孵育二抗后用PBST潤洗三次。 第五步： 用小鑷子分別將膜從封閉盒取出，置于小平皿中，滴加臨時(shí)配制的DAB進(jìn)行顯色10min。 是不是操作有問題，感覺結(jié)果不理想啊 [ Last edited by 1949stone on 2011-9-6 at 10:41 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有186人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法檢驗(yàn)人HLA2 Ⅰ抗體的新法
已經(jīng)有0人回復(fù)
chenzhenwei0
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 232.4
- 紅花: 1
- 帖子: 54
- 在線: 31.8小時(shí)
- 蟲號: 1169603
- 注冊: 2010-12-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
2樓2011-09-13 15:19:26
casey200788
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 2105.4
- 帖子: 631
- 在線: 221小時(shí)
- 蟲號: 1502048
- 注冊: 2011-11-21
- 專業(yè): 免疫生物學(xué)
3樓2011-11-24 17:20:42
chenzhenwei0
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 232.4
- 紅花: 1
- 帖子: 54
- 在線: 31.8小時(shí)
- 蟲號: 1169603
- 注冊: 2010-12-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
4樓2012-03-03 17:04:50
jiaxinfish
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 378.6
- 帖子: 981
- 在線: 310小時(shí)
- 蟲號: 1308763
- 注冊: 2011-05-28
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助哦 2012-03-05 11:02:08
chenzhenwei0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-03-06 09:45:48
chenzhenwei0(金幣+2): ★★★很有幫助 2012-03-07 15:28:49
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助哦 2012-03-05 11:02:08
chenzhenwei0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-03-06 09:45:48
chenzhenwei0(金幣+2): ★★★很有幫助 2012-03-07 15:28:49
w我看了你的步驟，你的應(yīng)該是正確的做法，。從你的結(jié)果來看，應(yīng)該是二抗結(jié)合一抗的能力很弱，所以造成顯色不明顯。另外也要考慮是不是顯示也有問題，如果是三種不同來源的二抗的話，理論上講，結(jié)合一抗的能力應(yīng)該是有所區(qū)別的，如果三個(gè)二抗都很弱的話，也可以換個(gè)顯色液試試 。不過你的做法還是很好的，很少有學(xué)生能想到這么做，贊一個(gè) |
5樓2012-03-03 17:45:47
jiaxinfish
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 378.6
- 帖子: 981
- 在線: 310小時(shí)
- 蟲號: 1308763
- 注冊: 2011-05-28
- 專業(yè): 生物化學(xué)
6樓2012-03-03 17:47:06
chenzhenwei0
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 232.4
- 紅花: 1
- 帖子: 54
- 在線: 31.8小時(shí)
- 蟲號: 1169603
- 注冊: 2010-12-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
7樓2012-03-05 10:55:01
chenzhenwei0
銅蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 232.4
- 紅花: 1
- 帖子: 54
- 在線: 31.8小時(shí)
- 蟲號: 1169603
- 注冊: 2010-12-14
- 專業(yè): 獸醫(yī)免疫學(xué)
8樓2012-03-05 11:00:16
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 chenzhenwei0 的主題更新
| 8 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +5 | A child 2026-03-28 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +11 | PolarBear11 2026-03-26 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +8 | lin0039 2026-03-26 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海理工能源動(dòng)力（085800）310分求調(diào)劑 +3 | zhangmingc 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
[考研] 283求調(diào)劑（080500） +4 | A child 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 劉柯@ 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +3 | Amber00 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 資源與環(huán)境 調(diào)劑申請(333分) +9 | holy J 2026-03-21 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856求調(diào)劑 +8 | zhn03 2026-03-25 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 總分293求調(diào)劑 +6 | 加一一九 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 290分調(diào)劑求助 +3 | 吉祥止止陳 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研一志愿蘇州大學(xué)初始315（英一）求調(diào)劑 +3 | sbdksD 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 材料考研調(diào)劑生
+3
|
黃粱一夢千年 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 085404電子信息284分求調(diào)劑
+4
|
13659058978 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 361求調(diào)劑 +3 | Glack 2026-03-22 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 269求調(diào)劑 +4 | 我想讀研11 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 接收2026碩士調(diào)劑(學(xué)碩+專碩) +4 | allen-yin 2026-03-23 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 306求調(diào)劑 +5 | 來好運(yùn)來來來 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|