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wmqouc金蟲 (著名寫手)
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[求助]
求助western blot
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各位大俠： 我在哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CCR3（膜蛋白GPCR中的一種），采用瞬轉(zhuǎn)法。在目的蛋白的C端接上了6個(gè)His。使用抗His的一抗做蛋白印記雜交。 用裂解液裂解細(xì)胞后，用蛋白印記雜交檢測(cè)是否表達(dá)。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)Dot blot有黑點(diǎn)，但是做Western blot發(fā)現(xiàn)沒有黑點(diǎn)。 Western blot比Dot blot多了電泳和轉(zhuǎn)膜，而Western blot中的陽(yáng)性對(duì)照出來(lái)了，自己的目的蛋白一片空白，奇怪啊! 這是很奇怪啊，到底是怎么回事啊，請(qǐng)各位幫忙分析一下。 謝謝啊! |
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wmqouc
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3樓2011-09-16 08:45:32
wmqouc
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5樓2011-09-16 09:29:00
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