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張小逸銅蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
引物設(shè)計(jì)的問(wèn)題
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| 引物的設(shè)計(jì)是不是都是用軟件進(jìn)行？還是人工自己來(lái)，本人新手，最近在做RAPD，引物設(shè)計(jì)方面碰到了不少問(wèn)題，求指教！謝謝 |
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張小逸
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6樓2011-10-07 16:39:46
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adslye(BioEPI+1): 鼓勵(lì)新蟲(chóng)！回復(fù)得很詳細(xì)！~國(guó)慶快樂(lè)~ 2011-09-30 17:06:16
張小逸(金幣+1): 非常感謝，很受用 2011-10-07 08:42:43
張小逸(金幣+1): 非常感謝，很受用 2011-10-07 08:42:43
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① 無(wú)需專門設(shè)計(jì)RAPD 擴(kuò)增反應(yīng)引物，也無(wú)須預(yù)先知道被研究生物基因組的核苷酸序列，引物可隨機(jī)合成和隨機(jī)選定，長(zhǎng)度一般為9- 10 個(gè)核苷酸； ② 每個(gè)RAPD 反應(yīng)中，僅加單個(gè)引物，就可通過(guò)引物和模板DNA 隨機(jī)配對(duì)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)增，擴(kuò)增無(wú)特異性； ③ 退火溫度低，一般為36℃，這樣的溫度能保證核苷酸引物與模板的穩(wěn)定結(jié)合，同時(shí)允許適當(dāng)?shù)腻e(cuò)誤配對(duì)，以擴(kuò)大引物在基因組DNA中配對(duì)的隨機(jī)性，使RAPD 有較高的檢出率； ④ RAPD 分析所需的DNA 樣品量極少 |
4樓2011-09-30 14:12:52
tdhslxiaoyao
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5樓2011-09-30 15:15:44
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