| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1012 | 回復(fù): 6 | |||
暗夜懶貓銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
載體構(gòu)建成功下一步遇難
|
| 好不容易構(gòu)建成功了一個載體,在把提取的質(zhì)粒導(dǎo)入表達(dá)受體細(xì)胞,涂卡那抗性的板長出菌落,但挑取菌落用液體培養(yǎng)基培養(yǎng),做菌液PCR檢測目的基因條帶時,卻沒有條帶出現(xiàn)。請問各位高手這是怎么回事?是質(zhì)粒沒導(dǎo)進(jìn)去?還是質(zhì)粒丟失了呢? |
木蟲 (正式寫手)
版筑飯牛的日子
|
呵呵,你是不是用的PET載體啊 1.看清楚你用的感受態(tài)細(xì)胞能不能接受這類的的載體哦,Origami™ B系列的菌對kan是不敏感的,如果你實在需要保證蛋白二硫鍵的形成,可以考慮換成Origami™ 2系列的感受態(tài)。 2.如果你確定了不是宿主菌和載體匹配性問題,那么很可能是載體丟失了,你搖菌的時候加入了kan沒,如果沒加,問題大概就出這里了。 3.你挑取的菌落應(yīng)該做一個菌落PCR,確保不做無用功,因為單靠抗生素篩選,貌似假陽性很高的耶。 我最近也在做表達(dá),多多交流 嘿嘿 |

銀蟲 (小有名氣)
專家顧問 (職業(yè)作家)
T.Shen
![]() |
專家經(jīng)驗: +57 |

銀蟲 (小有名氣)
木蟲 (正式寫手)
版筑飯牛的日子

| 7 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 284求調(diào)劑 +6 | 小熊~~ 2026-03-31 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 土木304求調(diào)劑 +4 | 兔突突突, 2026-03-31 | 5/250 |
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +9 | 舊吢 2026-03-24 | 9/450 |
|
|
[考研] 材料與化工調(diào)劑一志愿大連海事085600,349 +6 | 吃的不少 2026-03-30 | 6/300 |
|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑(331分) +8 | 111@127 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 288資源與環(huán)境專碩求調(diào)劑,不限專業(yè),有學(xué)上就行 +11 | lllllos 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料357 +3 | 麥恩莉. 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
[考研] 085601材料工程找調(diào)劑 +17 | oatmealR 2026-03-29 | 18/900 |
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | @MZB382400 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
[考研] 071010 323 分求調(diào)劑 +3 | Baekzhy 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
[考研] 化學(xué)308分調(diào)劑 +7 | 你好明天你好 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 環(huán)境科學(xué)與工程334分求調(diào)劑 +6 | 王一一依依 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +5 | wei-5 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
[考研] 085600,材料與化工321分求調(diào)劑 +10 | 大饞小子 2026-03-28 | 10/500 |
|
|
[考研] 352分-085602-一志愿985 +5 | 海納百川Ly 2026-03-29 | 5/250 |
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 爭取九點睡 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
[考研]
材料調(diào)劑
5+4
|
想要一壺桃花水 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
[考研] 中國科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍(lán)山月 2026-03-25 | 6/300 |
|