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構建質粒,但從質粒中擴增基因老p不出來。。急呀!求幫助~~
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最近在構建質粒,想從一個帶有目的基因的質粒中PCR出目的基因,可是跑出來的條帶都不是我想要的,目的基因1200bp,擴出來的有250、600、大于3000bp的,因為上游引物可以跟基因中間的序列連續(xù)5個堿基配對,所以又質粒上的序列設計了一段引物,但還是沒有目的條帶。 原本是打算從質粒上酶切下目的基因,但是雙酶切一直切不成功,做過單酶切都沒有問題,質粒一直構建不成功,急呀。。 |
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