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dreamswing木蟲 (小有名氣)
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[求助]
環(huán)狀基因組的PCR
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| 各位高手，環(huán)狀的基因組DNA做PCR要不要酶切之后在做PCR，這個(gè)基因組比較大，約有770k,而且GC含量較高。此外還有什么其他注意事項(xiàng)，望得到大家指導(dǎo) |
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brightfuture01
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2樓2011-11-25 17:55:01
susizheng
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【答案】應(yīng)助回帖
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wanhscn(金幣+2): 同意，我一般也不酶切！ 2011-11-25 21:29:23
wanhscn(金幣+2): 同意，我一般也不酶切！ 2011-11-25 21:29:23
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個(gè)人覺得沒必要切開吧，我就經(jīng)常用環(huán)狀質(zhì)粒當(dāng)模板擴(kuò)增，基本不存在什么問題。大腸桿菌基因組也是個(gè)環(huán)狀的，擴(kuò)增時(shí)稀釋下梯度擴(kuò)增也沒有什么問題。 如果你真要切開的話，怎么用酶也是個(gè)問題。 另外，個(gè)人認(rèn)為還是先設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增試試吧，做之前做好充分準(zhǔn)備是對(duì)的，但也不要沒做就擔(dān)心很多問題。 |
3樓2011-11-25 18:47:49
foreverjohn
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4樓2011-11-27 12:34:07
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5樓2011-11-30 15:05:06
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