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[求助]
關于GC含量高的模板
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各位大俠,請求幫助~~ 1.我的基因組是鏈霉菌,GC含量很高,有沒有哪家測這方面比較靠譜的測序公司推薦一個呀? 2.之前測序了幾個基因,但是都發(fā)現(xiàn)了同一個問題,比如送了一個基因的兩個克隆子(菌液,即平行樣)但是這兩個的測序結果堿基竟然有7~8個不一樣,是用EX TAQ做的,而且片段才將近1K,之前做克隆時都沒發(fā)現(xiàn)這樣的情況。請問這是什么問題呢? 小妹囊中羞澀,懸賞較少,還望各位大俠幫幫可憐的路人吧~~ |
【分子生物】EPI帖 |
木蟲 (正式寫手)
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呵呵,我剛做完了一個基因,GC含量片段前端局部高達87%,片段長3kb。Taq酶我也是一路涌過來的。不要用EXTAQ,也不要用LA TAQ,Prime Star with GC Buffer才是王道。ExTaq我沒用過,因為它根本不入我的法眼,Lataq With GC buffer我前期一直用,效果不咋地,根本得不到片段,現(xiàn)在還有幾管新的躺在我的冰箱。當然了,我的片段比較長,可能你的1KB能搞定也說不定。不過帶gc buffer 的lataq和primestar價格方面來說,prime star才貴了50,我們?yōu)槭裁床灰徊降轿恢苯佑胮rimestar呢。 希望對你有點幫助,好運 |
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)

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