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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 分子生物 » 綜合其他 » 關于GC含量高的模板
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關于GC含量高的模板
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各位大俠，請求幫助~~ 1.我的基因組是鏈霉菌，GC含量很高，有沒有哪家測這方面比較靠譜的測序公司推薦一個呀？ 2.之前測序了幾個基因，但是都發(fā)現(xiàn)了同一個問題，比如送了一個基因的兩個克隆子（菌液，即平行樣）但是這兩個的測序結果堿基竟然有7~8個不一樣，是用EX TAQ做的，而且片段才將近1K，之前做克隆時都沒發(fā)現(xiàn)這樣的情況。請問這是什么問題呢？ 小妹囊中羞澀，懸賞較少，還望各位大俠幫幫可憐的路人吧~~  |
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yabxxh
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【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數 +1
mengfei8336(MolEPI+1): 謝謝參與。 2011-12-15 09:26:03
baby0032(金幣+1): 2011-12-16 11:13:54
mengfei8336(MolEPI+1): 謝謝參與。 2011-12-15 09:26:03
baby0032(金幣+1): 2011-12-16 11:13:54
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呵呵，我剛做完了一個基因，GC含量片段前端局部高達87%，片段長3kb。Taq酶我也是一路涌過來的。不要用EXTAQ，也不要用LA TAQ，Prime Star with GC Buffer才是王道。ExTaq我沒用過，因為它根本不入我的法眼，Lataq With GC buffer我前期一直用，效果不咋地，根本得不到片段，現(xiàn)在還有幾管新的躺在我的冰箱。當然了，我的片段比較長，可能你的1KB能搞定也說不定。不過帶gc buffer 的lataq和primestar價格方面來說，prime star才貴了50，我們?yōu)槭裁床灰徊降轿恢苯佑胮rimestar呢。 希望對你有點幫助，好運 |
8樓2011-12-15 09:13:55
blackrose8089
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2樓2011-12-13 18:49:53
3樓2011-12-14 09:10:41
blackrose8089
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4樓2011-12-14 12:31:46
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7樓2011-12-15 08:20:54
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程序稍有變化，樓主可以試一下，曾經用這個擴出過7.3k的片段，無堿基錯誤. 9樓2011-12-15 09:54:56
10樓2011-12-15 10:36:10
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