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XUMIN6891金蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
連接與轉(zhuǎn)化問(wèn)題
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| 各位高手你們好！我想請(qǐng)教大家一個(gè)問(wèn)題：我最近做基因串聯(lián)，我的基因是重復(fù)的片段，我分別擴(kuò)出兩段大小相同的片段，大小都是357bp，然后通過(guò)中間設(shè)計(jì)的一個(gè)相同的限制性內(nèi)切酶（HindIII)，然后我在一個(gè)體系里把這兩段片段和載體連接起來(lái)，跟載體連接時(shí)我選的兩端的酶是（EcoR I,Xho I),然后就是轉(zhuǎn)化，挑菌，但是提完重組質(zhì)粒用它做pcr鑒定是啥也沒(méi)做出來(lái)，做雙酶切時(shí)有兩條帶但是那個(gè)小片段的條帶按說(shuō)連上應(yīng)該是684bp，但是跑電泳確在750bp處，我用的是2000bp的Market，這是不是意味著我連上的不對(duì)啊，高手指導(dǎo)指導(dǎo)��！謝謝了！或者有誰(shuí)能給指條更好地連接方法，針對(duì)這種重復(fù)片段需要串聯(lián)的，謝謝了！ |
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3樓2011-12-22 11:31:28
XUMIN6891
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