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XUMIN6891金蟲 (初入文壇)
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[求助]
連接與轉(zhuǎn)化問題
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| 各位高手你們好！我想請教大家一個問題：我最近做基因串聯(lián)，我的基因是重復(fù)的片段，我分別擴出兩段大小相同的片段，大小都是357bp，然后通過中間設(shè)計的一個相同的限制性內(nèi)切酶（HindIII)，然后我在一個體系里把這兩段片段和載體連接起來，跟載體連接時我選的兩端的酶是（EcoR I,Xho I),然后就是轉(zhuǎn)化，挑菌，但是提完重組質(zhì)粒用它做pcr鑒定是啥也沒做出來，做雙酶切時有兩條帶但是那個小片段的條帶按說連上應(yīng)該是684bp，但是跑電泳確在750bp處，我用的是2000bp的Market，這是不是意味著我連上的不對啊，高手指導(dǎo)指導(dǎo)��！謝謝了！或者有誰能給指條更好地連接方法，針對這種重復(fù)片段需要串聯(lián)的，謝謝了！ |
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5樓2013-05-19 09:40:24
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