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XUMIN6891金蟲 (初入文壇)
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[求助]
連接與轉化問題
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| 各位高手你們好!我想請教大家一個問題:我最近做基因串聯,我的基因是重復的片段,我分別擴出兩段大小相同的片段,大小都是357bp,然后通過中間設計的一個相同的限制性內切酶(HindIII),然后我在一個體系里把這兩段片段和載體連接起來,跟載體連接時我選的兩端的酶是(EcoR I,Xho I),然后就是轉化,挑菌,但是提完重組質粒用它做pcr鑒定是啥也沒做出來,做雙酶切時有兩條帶但是那個小片段的條帶按說連上應該是684bp,但是跑電泳確在750bp處,我用的是2000bp的Market,這是不是意味著我連上的不對啊,高手指導指導!謝謝了!或者有誰能給指條更好地連接方法,針對這種重復片段需要串聯的,謝謝了! |
鐵桿木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (初入文壇)
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至尊木蟲 (著名寫手)
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