 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5405 | 回復(fù): 34 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
lyta0木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
大片段PCR擴(kuò)增求助
|
|||
| 我要擴(kuò)增一個(gè)片段為3623bp的DNA,條件如下：98℃1分鐘，然后是四十個(gè)循環(huán)：98℃10秒，52℃10秒，68℃3分30秒，最后是68℃6分鐘，擴(kuò)了好幾次都失敗，求助各位高手 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 | 實(shí)驗(yàn)求助 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有163人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 求助 土壤基因組 PCR 擴(kuò)增問題
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 真菌ITS序列PCR擴(kuò)增 求助
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助！PCR擴(kuò)增不出全長DNA序列怎么辦？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】土壤DNA提取及PCR
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光PCR擴(kuò)增曲線問題
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR擴(kuò)增產(chǎn)物片段長度比設(shè)計(jì)時(shí)的要長很多？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】請教PCR條件優(yōu)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】大片段pcr問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】請教兩條片段通過PCR橋接擴(kuò)增的方法
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】大片段連接轉(zhuǎn)化成功與否問題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR擴(kuò)增核心片段，再也擴(kuò)不出來了，怎么辦
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】重組質(zhì)粒PCR的taq酶選擇！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】以cDNA為模板PCR擴(kuò)增目的片段時(shí)條帶較淺原因
已經(jīng)有13人回復(fù)
lyta0
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1760.3
- 散金: 471
- 帖子: 260
- 在線: 96.9小時(shí)
- 蟲號: 583300
- 注冊: 2008-07-25
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
3樓2012-01-18 21:05:55
西瓜
榮譽(yù)版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 貴賓: 3.157
- 金幣: 1849.6
- 散金: 11458
- 紅花: 116
- 沙發(fā): 21
- 帖子: 7553
- 在線: 1449.5小時(shí)
- 蟲號: 271749
- 注冊: 2006-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞衰老
- 管轄: 分子生物
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lyta0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-01-18 21:13:19
lyta0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-01-18 21:13:19
|
3.6kb并不大，應(yīng)該不難。 我覺得變性和退火的時(shí)間短了點(diǎn)，我們實(shí)驗(yàn)室一般用95℃/30秒變性，55℃/45秒退火，我自己用的是95℃/20秒變性，55℃/30秒退火。上面說的是常用的條件，如果擴(kuò)增不出來就降低退火溫度，特異性不高就提高退火溫度，一般都能做出來的。 Taq酶每分鐘擴(kuò)增1kb，延伸時(shí)間3分30秒感覺不夠。雖然一般這樣也能做出來，但是既然你沒做出來，我建議延伸時(shí)間改成4分鐘。 另外，試劑也可能出問題。你的試劑做其他PCR是否正常呢？ |
2樓2012-01-18 18:59:32
西瓜
榮譽(yù)版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 貴賓: 3.157
- 金幣: 1849.6
- 散金: 11458
- 紅花: 116
- 沙發(fā): 21
- 帖子: 7553
- 在線: 1449.5小時(shí)
- 蟲號: 271749
- 注冊: 2006-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞衰老
- 管轄: 分子生物
4樓2012-01-19 00:04:46
lyta0
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1760.3
- 散金: 471
- 帖子: 260
- 在線: 96.9小時(shí)
- 蟲號: 583300
- 注冊: 2008-07-25
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
5樓2012-01-19 01:07:21
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 085602化工求調(diào)劑（331分） +8 | 111@127 2026-03-30 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +7 | DLkz1314. 2026-03-30 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | AZMK 2026-03-29 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑 +9 | hanamiko 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 346求調(diào)劑 一志愿070303有機(jī)化學(xué) +7 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料科學(xué)與工程調(diào)劑 +8 | 深V宿舍吧 2026-03-30 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 324求調(diào)劑 +9 | hanamiko 2026-03-26 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 085602 化學(xué)工程專碩 340分求調(diào)劑 +4 | qianbai11 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +7 | 小蠟新筆 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 327求調(diào)劑 +6 | 汲亦昊 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 349求調(diào)劑 +6 | 李木子啊哈哈 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 爭取九點(diǎn)睡 2026-03-28 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿華理，數(shù)一英一285求A區(qū)調(diào)劑 +8 | AZMK 2026-03-25 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等調(diào)劑 +7 | 哇呼哼呼哼 2026-03-27 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0856，材料與化工321分求調(diào)劑 +12 | 大饞小子 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +7 | 墨墨漠 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 【2026考研調(diào)劑】制藥工程 284分 求相關(guān)專業(yè)調(diào)劑名額 +4 | 袁奐奐 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理085500機(jī)械專業(yè)總分300求調(diào)劑 +3 | an10101 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-24 | 4/200 |
|