 |
 |
 |
| 24小時(shí)熱門版塊排行榜 |
- >論壇更新日志 (1380)
- >考研 (176)
- >導(dǎo)師招生 (118)
- >蟲友互識(shí) (62)
- >考博 (26)
- >文獻(xiàn)求助 (25)
- >論文投稿 (23)
- >碩博家園 (16)
- >博后之家 (15)
- >文獻(xiàn)求助完結(jié)子版 (14)
- >找工作 (14)
- >基金申請(qǐng) (10)
- >論文道賀祈福 (8)
- >休閑灌水 (8)
- >教師之家 (7)
- >職場(chǎng)人生 (5)
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 5416 | 回復(fù): 34 | ||||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||||
lyta0木蟲 (小有名氣)
|
[求助]
大片段PCR擴(kuò)增求助
|
|||
| 我要擴(kuò)增一個(gè)片段為3623bp的DNA,條件如下：98℃1分鐘，然后是四十個(gè)循環(huán)：98℃10秒，52℃10秒，68℃3分30秒，最后是68℃6分鐘，擴(kuò)了好幾次都失敗，求助各位高手 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 | 實(shí)驗(yàn)求助 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有159人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽(yáng)學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 求助 土壤基因組 PCR 擴(kuò)增問(wèn)題
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 真菌ITS序列PCR擴(kuò)增 求助
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求助！PCR擴(kuò)增不出全長(zhǎng)DNA序列怎么辦？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】土壤DNA提取及PCR
已經(jīng)有20人回復(fù)
- 【求助/交流】熒光PCR擴(kuò)增曲線問(wèn)題
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】為什么PCR擴(kuò)增產(chǎn)物片段長(zhǎng)度比設(shè)計(jì)時(shí)的要長(zhǎng)很多？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教PCR條件優(yōu)化
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】大片段pcr問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】請(qǐng)教兩條片段通過(guò)PCR橋接擴(kuò)增的方法
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】大片段連接轉(zhuǎn)化成功與否問(wèn)題
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR擴(kuò)增核心片段，再也擴(kuò)不出來(lái)了，怎么辦
已經(jīng)有16人回復(fù)
- 【求助/交流】重組質(zhì)粒PCR的taq酶選擇！
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】以cDNA為模板PCR擴(kuò)增目的片段時(shí)條帶較淺原因
已經(jīng)有13人回復(fù)
西瓜
榮譽(yù)版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 貴賓: 3.157
- 金幣: 1849.6
- 散金: 11458
- 紅花: 116
- 沙發(fā): 21
- 帖子: 7553
- 在線: 1449.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 271749
- 注冊(cè): 2006-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞衰老
- 管轄: 分子生物
4樓2012-01-19 00:04:46
西瓜
榮譽(yù)版主 (知名作家)
- MolEPI: 50
- 應(yīng)助: 94 (初中生)
- 貴賓: 3.157
- 金幣: 1849.6
- 散金: 11458
- 紅花: 116
- 沙發(fā): 21
- 帖子: 7553
- 在線: 1449.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 271749
- 注冊(cè): 2006-08-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 細(xì)胞衰老
- 管轄: 分子生物
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
lyta0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-01-18 21:13:19
lyta0(金幣+5): ★★★很有幫助 2012-01-18 21:13:19
|
3.6kb并不大，應(yīng)該不難。 我覺(jué)得變性和退火的時(shí)間短了點(diǎn)，我們實(shí)驗(yàn)室一般用95℃/30秒變性，55℃/45秒退火，我自己用的是95℃/20秒變性，55℃/30秒退火。上面說(shuō)的是常用的條件，如果擴(kuò)增不出來(lái)就降低退火溫度，特異性不高就提高退火溫度，一般都能做出來(lái)的。 Taq酶每分鐘擴(kuò)增1kb，延伸時(shí)間3分30秒感覺(jué)不夠。雖然一般這樣也能做出來(lái)，但是既然你沒(méi)做出來(lái)，我建議延伸時(shí)間改成4分鐘。 另外，試劑也可能出問(wèn)題。你的試劑做其他PCR是否正常呢？ |
2樓2012-01-18 18:59:32
lyta0
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1760.3
- 散金: 471
- 帖子: 260
- 在線: 96.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 583300
- 注冊(cè): 2008-07-25
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
3樓2012-01-18 21:05:55
lyta0
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1760.3
- 散金: 471
- 帖子: 260
- 在線: 96.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 583300
- 注冊(cè): 2008-07-25
- 專業(yè): 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
5樓2012-01-19 01:07:21
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 304材料求調(diào)劑
+5
|
鐘llll 2026-03-26 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 抱歉 +3 | 田洪有 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +10 | 宋明欣 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +3 | 末未mm 2026-03-30 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +6 | @MZB382400 2026-03-28 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +10 | 1124361 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 面上5B能上會(huì)嗎？ +7 | redcom 2026-03-29 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 085602 化學(xué)工程專碩 340分求調(diào)劑 +4 | qianbai11 2026-03-29 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | QiMing7 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +6 | 愛(ài)羈絆 2026-03-29 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收 +9 | 天天好運(yùn)來(lái)上岸?/a> 2026-03-24 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +5 | 1428151015 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 352分 化工與材料 +5 | 海納百川Ly 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 安徽大學(xué)專碩生物與醫(yī)藥專業(yè)(086000)324分，英語(yǔ)已過(guò)四六級(jí)，六級(jí)521，求調(diào)劑 +4 | 美味可樂(lè)雞翅 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +3 | 溪云珂 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +7 | 青檸檬1 2026-03-26 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 一志愿 本科 北科大 化學(xué) 343 +6 | 13831862839 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 打過(guò)很多競(jìng)賽，085406控制工程300分，求調(diào)劑 +3 | askeladz 2026-03-26 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 李李不服輸 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 300分，材料，求調(diào)劑，英一數(shù)二 +5 | 超贊的 2026-03-24 | 5/250 |
|